紫薯花青素调节p53-p21Waf1/Cip1信号通路对辐射致造血干/祖细胞衰老的保护

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目的 探讨紫薯花青素(solanum tuberdsm anthocyanin,STA)调节p53-p21Waf1/Cip1信号通路对辐射致造血干/祖细胞衰老的保护作用及其分子机制。方法 将C57BL/6小鼠随机分为对照组、模型组、STA治疗组和STA预防组,X射线照射构建衰老细胞模型。给药后用血细胞分析仪检测各组小鼠血象;免疫磁性分选法分离纯化各组小鼠Sca-1+ HSC/HPC,并用衰老相关β-半乳糖苷酶(senescence-associated β-galactosidase,SA-β-Gal)对其进行染色计算各组阳性率;造血祖细胞混合集落培养(colony forming unit-mixture, CFU-Mix)评价各组细胞形成造血祖细胞集落能力与分化潜能;流式细胞术分析细胞周期;实时定量聚合酶链反应(real time polymerase chain reaction,Real time PCR)检测p53和p21Waf1/Cip1mRNA的表达;Western blot 检测p53和p21Waf1/Cip1蛋白的表达。结果 模型组小鼠于辐照后外周血象RBC、WBC、PLT均明显低于对照组(P<0.01),与模型组相比,STA治疗组和预防组小鼠外周血象显著恢复(P<0.05),且STA预防组小鼠外周血象恢复显著好于STA治疗组(P<0.05);模型组衰老细胞阳性率极显著高于对照组(P<0.01),与模型组比较,STA治疗组和STA预防组阳性细胞率显著较低(P<0.05),且STA预防组阳性细胞率低于STA治疗组(P<0.05);模型组Sca-1+ HSC/HPC形成CFU-Mix数量与对照组相比明显减少(P<0.01),与模型组比较,STA治疗组和STA预防组形成CFU-Mix数量升高(P<0.05);与对照组相比,模型组G0/G1期比例明显增高,G2/M和S期比例极显著降低(P<0.01),与模型组相比,STA治疗组和STA预防组G0/G1期比例显著较低,G2/M和S期比例显著升高(P<0.05),且STA预防组与STA治疗组相比亦有显著差异(P<0.05);模型组p53和p21Waf1/Cip1mRNA和蛋白的表达极显著高于对照组(P<0.01),与模型组相比,STA治疗组和STA预防组的p53和p21Waf1/Cip1mRNA和蛋白的表达显著降低(P<0.05),且STA预防组比STA治疗组明显降低(P<0.05)。结论 STA可以通过调节p53-p21Waf1/Cip1信号通路保护受到辐射的造血干/祖细胞。
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