【摘 要】
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利用RT-PCR技术扩增1型鸭肝炎病毒(DHV-1)E53株VP1基因序列,将其连入pET-30a载体中,构建原核表达载体pET-30a-VP1,并转化至宿主菌Rosetta(DE53)plysS中,经IPTG诱导后,SDS
【机 构】
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东北农业大学动物医学学院,黑龙江哈尔滨,150030
【出 处】
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第三届京津冀畜牧兽医科技创新研讨会暨“瑞普杯”新思想、新方法、新观点论坛
论文部分内容阅读
利用RT-PCR技术扩增1型鸭肝炎病毒(DHV-1)E53株VP1基因序列,将其连入pET-30a载体中,构建原核表达载体pET-30a-VP1,并转化至宿主菌Rosetta(DE53)plysS中,经IPTG诱导后,SDS-PAGE分析表明VP1蛋白在大肠杆菌中获得了表达,western blot表明表达产物具有良好的反应原性.将表达产物纯化后免疫新西兰大白兔,制备的多克隆抗体可特异性识别DHV-1,间接ELISA测定多克隆抗体效价达1∶12800,中和实验测定多克隆抗体中和抗体效价达1∶32.本研究表达的蛋白和制备的多克隆抗体为VP1蛋白功能的进一步研究和诊断制剂的开发提供了重要数据和材料.
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