【摘 要】
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目的探讨胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)对人结肠癌细胞(HT-29细胞)自噬和凋亡的影响及可能机制。方法将HT-29细胞分四组:对照组(简称NC组),TNF-α组,GDNF组,Ly294002(PI3K
【机 构】
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贵阳医学院附属人民医院; 四川大学华西医院;
【基金项目】
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国家自然科学基金资助(NO.30770983)
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目的探讨胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)对人结肠癌细胞(HT-29细胞)自噬和凋亡的影响及可能机制。方法将HT-29细胞分四组:对照组(简称NC组),TNF-α组,GDNF组,Ly294002(PI3K抑制剂)组(简称Ly组)。MDC荧光染色和电镜检测HT-29细胞自噬,细胞凋亡试剂盒检测HT-29细胞凋亡,采用Western-blotting法检测HT-29细胞Caspase-3、Bcl-2、LC3-I/II及p-AKT的表达。数据用均数±标准差表示。使用统计学软件SPSS16.0进行统计学分析。统计方法:方差分析,P≤0.05为差异有统计学意义。结果与NC组比较,TNF-α组LC3B表达下降,经GDNF干预后LC3B表达增加,尤其是LC3B的活化状态LC3-Ⅱ明显增加(P≤0.05),Ly组LC3-Ⅱ也明显增加,但没有GDNF组增加明显。Ly组Caspase-3增加最多,其次是TNF-α组,再其次是GDNF组,NC组最少。而Bcl-2表达情况不一样,GDNF组较NC组增加(P≤0.05),TNF-α组较NC组减少,Ly组较NC组减少最明显。TNF-α组p-AKT表达比NC组增强,经GDNF干预后p-AKT表达进一步增强(P≤0.05),而Ly组p-AKT表达很少。结论GDNF在体外能有效地促进HT-29细胞自噬、抑制其凋亡。GDNF对凋亡的抑制作用可能与其影响自噬和PI3K/AKT信号传导通路有关。
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