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目的:克隆有T-B联合表位的细粒棘球蚴特异性蛋白抗原优势表位区段,在原核表达系统中表达重组蛋白,鉴定和分析表达产物。方法 :根据生物信息学方法预测出的优势表位EgG1Y162-1和EgG1Y162-2分子克隆构建两段区域的重组表达质粒pET32a(+)-egG1Y162-1和pET32a(+)-egG1Y162-2,转化大肠杆菌诱导表达蛋白,SDS-PAGE电泳法分析经亲和层析法纯化的蛋白。用纯化的蛋白免疫家兔获取多克隆抗体,ELISA法检测抗体效价,Westernblot方法进行血清学鉴定。结果 :EgG1Y162重组蛋白分为EgG1Y162-1(1-51aa)、EgG1Y162-2(52-120aa)两段,构建的EgG1Y162-1/2抗原优势表位区域的重组表达质粒pET32a(+)-EgG1Y162-1和pET32a(+)-EgG1Y162-2能够高效表达重组蛋白。表达的目的蛋白EgG1Y162-1、EgG1Y162-2分子量约为26.2kDa、28.1kDa。UVP扫描证实目的蛋白以可溶性蛋白的形式表达分别约占总蛋白的39%和43%。Western-blot显示EgG1Y162-1与感染包虫犬血清无明显反应,与感染人血清有微弱的反应,与阴性犬血清和阴性人血清均不反应。EgG1Y162-2与感染包虫人和感染包虫犬血清均有明显的免疫反应,与阴性犬血清和阴性人血清均不反应。获得EgG1Y162和EgG1Y162-1/2多克隆抗体,ELISA法检测了兔抗体效价水平,EgG1Y162为1:20480,EgG1Y162-1为1:5120,EgG1Y162-2为1:20480。结论 :构建的EgG1Y162-2刺激机体产生的免疫反应和抗体水平明显高于EgG1Y162-1。EgG1Y162中较强特异性的优势抗原表位可能分布在EgG1Y162-2片段中,这为精确地定位EgG1Y162抗原表位的氨基酸残基,构建高效的多表位疫苗奠定了基础。