【摘 要】
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石斑鱼是一种名贵的海产鱼类,是一种雌雄同体雌性先熟的种类,其生活史存在性反转现象.Granulin蛋白是一种自分泌生长因子,在很多条件下与胰岛素样生长因子IGF具有相似的功能,在生长发育中发挥重要的作用.我们在斜带石斑鱼的天然性反转转录组中发现了三种granulin基因,分别命名为granulin1,granulin2和granulin3.其中granulin1和granulin2基因在雄鱼中的表
【机 构】
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中山大学水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物良种繁育重点实验室,广东广州 510275
【出 处】
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第七届全国石斑鱼类繁育与养殖产业化论坛
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石斑鱼是一种名贵的海产鱼类,是一种雌雄同体雌性先熟的种类,其生活史存在性反转现象.Granulin蛋白是一种自分泌生长因子,在很多条件下与胰岛素样生长因子IGF具有相似的功能,在生长发育中发挥重要的作用.我们在斜带石斑鱼的天然性反转转录组中发现了三种granulin基因,分别命名为granulin1,granulin2和granulin3.其中granulin1和granulin2基因在雄鱼中的表达量是雌鱼表达量的三十多倍,granulin3基因在雄鱼中的表达量是雌鱼表达量的0.5倍,表明了granulin基因在石斑鱼的性反转中起到了一定的作用.我们对三种granulin基因进行了RACE扩增,granulin1的全长3350 bp,其开放阅读框(ORF)为2217bp,编码739个氨基酸；granulin2的全长为1378 bp,其开放阅读框为888 bp,编码296个氨基酸；granulin3的全长为3237 bp,其开放阅读框为2433 bp,编码811个氨基酸.利用双分子荧光互补(BiFC)技术,构建了pBIFC-VN 155-granulin1、pBIFC-VN 155-granulin2、pBIFC-VN 155-granulin3三种N段真核表达质粒和pBIFC-VC 155-ARl、pBIFC-VC 155-AR2、pBIFC-VC 155-ERαt、pBIFC-VC 155-ERβ1、pB IFC-VC 155-Erβ2、pBIFC-VC155-LHR1、pBIFC-VC 155-LHR2、pBIFC-VC 155-FSHR八种不同激素受体的C端真核表达质粒,逐个将3种N段真核表达质粒分别与8种C段真核表达质粒共转染到293T细胞,若N段表达质粒与C段表达质粒有相互作用,则可以观察到荧光现象.结果：pBIFC-VN155-granulin3与pBIFC-VC155-ERα在细胞内结合出现的荧光信号,表明granulin3与雌激素受体ERα可以相互作用.具体作用机制,还需进一步验证.
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