【摘 要】
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为了掌握近年来中国羊泰勒虫病的流行现状,并对其分离株进行分子分类学鉴定.对分离自2005-2011年间的羊血液基因组以及蜱基因组,依次用吕氏泰勒虫、尤氏泰勒虫和绵羊泰勒虫特异引物进行PCR扩增.对阳性样品进行18S rRNA基因的特异扩增和测序分析,并建立系统发育树.PCR扩增表明在中国所调查的4省9县市,羊泰勒虫病的流行存在明显差异.甘肃省羊泰勒虫病的发病率和感染率较高,主要呈吕氏泰勒虫和尤氏泰
【机 构】
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家畜疫病病原生物学国家重点实验室,甘肃省寄生虫学重点实验室,农业部草食动物疫病重点实验室,中国农业科学院兰州兽医研究所 甘肃兰州730046
【出 处】
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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第七次代表大会暨第十二次学术研讨会
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为了掌握近年来中国羊泰勒虫病的流行现状,并对其分离株进行分子分类学鉴定.对分离自2005-2011年间的羊血液基因组以及蜱基因组,依次用吕氏泰勒虫、尤氏泰勒虫和绵羊泰勒虫特异引物进行PCR扩增.对阳性样品进行18S rRNA基因的特异扩增和测序分析,并建立系统发育树.PCR扩增表明在中国所调查的4省9县市,羊泰勒虫病的流行存在明显差异.甘肃省羊泰勒虫病的发病率和感染率较高,主要呈吕氏泰勒虫和尤氏泰勒虫混合感染,现场调查危害比较严重.新疆喀什仅存在绵羊泰勒虫,调查没有见到临床发病病例.在湖北样品中检测到吕氏泰勒虫,但未发现临床上发病病例.在云南样品中没有检测到羊泰勒虫及其发病病例.羊泰勒虫病在中国上述区域呈现不同程度的发病率和感染率,该研究为这些区域羊泰勒虫病的综合防治提供了参考依据.
其他文献
2001年用采自新疆牛羊体的血红扇头蜱和小亚璃眼蜱感染除脾绵羊时,分离获得一株巴贝斯虫,通过对其形态特征、致病性、传播媒介和18S rRNA与ITS基因序列比对分析等研究,初步确定其为一种新发现的羊巴贝斯虫,并将其暂命名为羊巴贝斯虫未定种新疆株.为了对该寄生虫进行深入研究,本研究应用感染的羊血,建立了该寄生虫持续体外培养系统.在24和6孔板中,以RPMI 1640培养液,添加20％的胎牛血清和7.
本研究以体外培养获得的裂殖子可溶性抗原建立了一种对本病原特异性的ELISA方法.通过应用371份阴性血清和112份阳性血清对该方法进行特异性和敏感性的评价结果显示,当阳性阈值确定为24.65％的抗体比率时,对应的特异性和敏感性为97.3％.同时,交叉反应实验结果显示,感染我国羊的其它主要梨形虫(莫氏巴贝斯虫、尤氏泰勒虫和吕氏泰勒虫)和羊无浆体的阳性血清与该可溶性抗原在western blot和EL
本研究应用体外培养单克隆的莫氏巴贝斯虫临潭株G7株,纯化获得裂殖子,提取/纯化RNA和mRNA,构建裂殖子cDNA表达文库.以感染后第6周的羊血清,用免疫学筛选技术,自该cDNA文库中筛选获得5个具有较高相似性的EST片段(297-357bp).然后应用5RACE扩增技术,扩增获得一个1140bp的基因,同源性分析表明,BQP35与牛巴贝斯虫的一个假定蛋白具有26％的相似性.结果显示,该蛋白是一个
本研究旨在测定新疆巴贝斯虫rap-1基因序列和分析其分子特征,研究结果显示新疆巴贝斯虫rap-1基因座由rap-1a基因组成,该基因序列分为明显的三个区域,位于5’和3’的两个保守区和中间的一个变异区.3’保守区分为两类基因序列,仅在7个核苷酸位点存在变异.新疆巴贝斯虫rap-1基因座因此包含多个rap-1a基因拷贝.变异区由一系列的36bp变异的重复基因序列组成.这些重复的变异序列特征在以前的绵
本研究测定了临潭株棒状体相关蛋白的多基因家族的基因序列及基因座结构.结果显示临潭株的棒状体相关蛋白(rap-1)基因座复杂的基因结构。1),存在三种rap-1基因类型(rap-1a,rap-1b and rap-1c);2),rap-1a和rap-1b包含多个基因拷贝；3),rap-1a基因存在基因多态性,包含两种rap-1a基因类型(命名为:rap-1a 61和rap-1a 67)同源性为95.
田鼠巴贝斯虫分泌抗原(BmSAl)是一个重要的诊断抗原候选分子,但全长蛋白的表达量少,也不宜纯化.本研究在此基础上,通过生物信息学分析,选取N末端信号肽后,C-末端跨膜区前,包含CPSF73:100_C功能区的228个氨基酸所编码基因片段,重组高效表达了一个可溶性截短型抗原,解决了完整蛋白重组表达纯化的困难.纯化的截短型抗原作为酶联免疫试验(ELISA)诊断抗原可清晰地区分阴性及阳性鼠血清,并与其
为了制备牛瑟氏泰勒虫病基因工程亚单位疫苗,根据GenBank上发表的牛瑟氏泰勒虫P23表面蛋白基因序列及黄牛IL-18基因序列,设计两对特异性引物,通过重组PCR技术将两段基因拼接后克隆到pMD-18-T载体,经过PCR、酶切和测序鉴定后,再亚克隆到pET-28a原核表,达载体,构建pET-28a-p23-IL-18重组原核表达载体,将鉴定正确的质粒转化大肠杆菌BL21感受态细胞,在37℃用IPT
2012年9月,大庆某牧场7头奶牛出现羞明流泪、巩膜充血,皮毛脱落、皮肤增厚和龟裂等症状,肘、颈和肩部尤为严重；病畜眼巩膜有沙粒状包囊突起,身体局部皮肤呈“木板状”增厚,脱毛,潮红,肿胀；两眼上下眼睑肿胀,褶皱明显,是典型的“象皮病”症状,初步确定为牛贝诺孢子虫病.取病牛眼巩膜上包囊进行压片和镜检,发现大量球形包囊,包囊内含有大量月牙形的缓殖子；采集病牛的外周血,进行血液涂片并吉姆萨染色,在显微镜
本研究首先对新疆吐鲁番及和静地区该病的流行情况进行调查,筛选了阳性病料.采用PCR方法,利用设计的三对特异性引物分别扩增牛环形泰勒虫新疆株Tams1基因的三段区域(全长基因,扩增片段缺乏N端及C端疏水区、仅缺乏N端疏水区区域),构建三种重组表达载体,通过SDS-PAGE电泳分析比较三种重组质粒蛋白表达量及表达形式,最终筛选获得高可溶性表达重组质粒.优化其表达条件,并对纯化的蛋白进行Western
为研究我国南方四省区羊泰勒虫病的流行情况,分别采用血涂片镜检和PCR方法对采自我国广西壮族自治区、贵州省、广东省和重庆市部分地区的180份份羊血液样品进行检测,并对部分阳性样品进行测序分析.PCR检测结果显示,在贵州省、广东省和重庆市的样品中均有羊泰勒虫感染,其中吕氏泰勒虫平均阳性率分别为46.8％(29/62)、90.9％(30/33)和12.7(7/55),绵羊泰勒虫和尤氏泰勒虫均为阴性；广西