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苯巴比妥为镇静类药物,本文应用高效液相色谱法建立了鱼、虾和甲鱼中苯巴比妥的残留量的测定方法.以草鱼、凡纳滨对虾肌肉和甲鱼样品为代表材料,经乙酸乙酯提取两次,正己烷脱脂肪,通过C18固相萃取柱进行固相萃取净化,用二氯甲烷进行洗脱,高效液相色谱-紫外检测法进行检测.检测结果：苯巴比妥在0.05 μg/mL～4.0μg/mL范围内成良好线性关系,R2=0.9999,加标回收率为80.49％～100.07％,相对标准偏差为1.52％～10.15％,检出限：10 μg/kg.