【摘 要】
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目的 研究中暑小鼠血清及热打击对原代培养人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)炎症因子表达的影响及其机制.方法 分离人脐静脉内皮细胞HUVECs,光镜下观察细胞形态并对其染VE-Cadherin及Ⅷ因子进行鉴定.分别给予43℃1h热打击(热打击组)或中暑小鼠血清刺激(血清刺激组),24h后分别提取总RNA,荧光定量PCR检测T
【机 构】
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广州军区广州总医院重症医学科,广东 广州 510010;南方医科大学,广东 广州 510515 广
【出 处】
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中国微循环学会2014年全国学术会议
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目的 研究中暑小鼠血清及热打击对原代培养人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)炎症因子表达的影响及其机制.方法 分离人脐静脉内皮细胞HUVECs,光镜下观察细胞形态并对其染VE-Cadherin及Ⅷ因子进行鉴定.分别给予43℃1h热打击(热打击组)或中暑小鼠血清刺激(血清刺激组),24h后分别提取总RNA,荧光定量PCR检测TNF-α、IL-6及IL-1β的mRNA表达水平,western blot检测P65表达水平,提取胞浆及胞核蛋白检测其核转位情况.结果 所分离HUVECs纯度较高,光镜下细胞呈特征性鹅卵石形状排列,VE-Cadherin及Ⅷ因子均可染色.与正常对照组相比,给予43℃1h的热打击24h后,TNF-α、IL-6及IL-1β的mRNA水平表达降低(P＜0.05),NF-KBP65表达水平降低,P65并未在核内累积；而给予10％中暑小鼠血清刺激24h后TNF-α、IL-6及IL-1β的mRNA水平表达增加(P＜0.01),NF-KBP65表达未发生明显变化,但其核转位增加.结论 热打击并未使HUVECs炎症因子表达增加,而给予中暑小鼠血清刺激后NF-KB发生活化,其炎症因子表达显著上调,是中暑相关全身炎症反应综合征(systemic inflammatory response syndrome, SIRS)重要机制.
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