鳜弹状病毒灭活方法及双抗体夹心ELISA检测方法的建立

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为了确立鳜弹状病毒(Siniperca chuatsi rhabdovirus,SCRV)的灭活条件,本实验采用BPL溶液和甲醛溶液对SCRV进行灭活,结果显示:2‰的BPL溶液在4℃作用72h,2‰甲醛溶液在28℃作用6h及1‰甲醛溶液在28℃作用12h可完全灭活SCRV。为了检测灭活疫苗抗原含量,将纯化SCRV病毒及重组G蛋白蛋白分别免疫小鼠,经融合、克隆、筛选,共获得单克隆杂交瘤细胞9株,经2种抗原及表位筛选和竞争法测试表位情况,最后选取识别病毒较好的细胞株4E12 1F3和4H8 1F11制备抗体建立标准化夹心ELISA方法。使用该方法对病毒及疫苗进行检测,发现该法测定的抗原含量与病毒滴度呈正相关,抗原含量可以敏感显示出病毒滴度的变化,说明此方法是可靠的,可以用来检测SCRV疫苗抗原含量。
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