【摘 要】
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目的 重编程诱导大鼠MSCs向胰岛素分泌细胞分化.方法 原代培养的大鼠MSCs经分离、培养至第三代后,用负向调节子REST/NRSF、SHH慢病毒干扰载体以及正向调节子PDX1慢病毒过表达载体共转染,并培养10d,实时定量PCR检测胰岛细胞分化相关基因的表达,免疫荧光检测胰岛素、胰高血糖素及生长抑素的表达.ELISA检测胰岛素分泌.结果 慢病毒转染后胰岛素、胰高血糖素及生长抑素的表达明显升高,胰岛
【机 构】
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中国医科大学细胞生物学卫生部重点实验室干细胞与再生医学研究室,沈阳 110001;辽宁省计划生育科学研究院,辽宁省生殖医学重点实验室,沈阳 110031
【出 处】
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中华医学会医学细胞生物学分会第三届全国学术会议
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目的 重编程诱导大鼠MSCs向胰岛素分泌细胞分化.方法 原代培养的大鼠MSCs经分离、培养至第三代后,用负向调节子REST/NRSF、SHH慢病毒干扰载体以及正向调节子PDX1慢病毒过表达载体共转染,并培养10d,实时定量PCR检测胰岛细胞分化相关基因的表达,免疫荧光检测胰岛素、胰高血糖素及生长抑素的表达.ELISA检测胰岛素分泌.结果 慢病毒转染后胰岛素、胰高血糖素及生长抑素的表达明显升高,胰岛内分泌细胞分化的相关基因SLc2a2,Nkx6.1,NeuroD1,ngn3,Mafa的表达均有不同程度的升高；并检测到胰岛素的分泌.结论 通过用shREST/NRSF、shSHH及PDX1慢病毒载体转染大鼠MSCs,能够使其重编程分化为胰岛素分泌细胞.
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