【摘 要】
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(目的)比较硫酸化麦冬多糖(sOPS)对鸡新城疫病毒感染细胞能力和治疗鸡新城疫效果的影响,探讨硫酸化修饰提高麦冬多糖抗病毒活性的可能性。(方法)用水煎醇沉法提取粗麦冬多糖,
【基金项目】
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国家自然科学基金(30871887);国家科技支撑计划(2011BAD34B02)
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(目的)比较硫酸化麦冬多糖(sOPS)对鸡新城疫病毒感染细胞能力和治疗鸡新城疫效果的影响,探讨硫酸化修饰提高麦冬多糖抗病毒活性的可能性。(方法)用水煎醇沉法提取粗麦冬多糖,经三氯乙酸法除蛋白、DEAE-纤维素-52柱层析得到麦冬多糖,用氯磺酸-吡啶法进行硫酸化修饰,以氯磺酸-吡啶配比、反应温度和反应时间三因素、三水平正交设计9种修饰条件,得到9种硫酸化麦冬多糖sOPS1~sOPS9。体外实验,用MTT法测定9个硫酸化麦冬多糖对NDV感染鸡胚成纤维细胞能力的影响,以未修饰的OPS为对照;体内试验,选择体外试验筛选出活性最强的sOPS3为研究对象,观察其对人工感染ND的疗效。取27日龄350羽雏鸡随机均分为6组,除空白对照组外,其余各组用新城疫强毒对其进行人工感染,攻毒6 h后,4个多糖组分别肌肉注射3种剂量的sOPS3和未修饰的OPS,病毒对照组和空白对照组注射等量生理盐水,每天1次,连续3 d。每天观察鸡群发病、死亡情况,死亡鸡剖检,连续观察14 d,统计死亡率、显效率、痊愈率和总有效率。(结果)体外试验结果显示,各硫酸化多糖在一定的浓度均能显著抑制NDV感染CEF,sOPS3的活性最强。体内试验结果显示,除了sOPS3H组和OPS组外,其余各组的死亡率均显著低于病毒对照组,总有效率均显著高于病毒对照;所有各组的痊愈率均显著高于病毒对照组。其中sOPS3中剂量组的死亡率最低、痊愈率和总有效率最高。(结论)以上结果表明,硫酸化修饰能够显著提高麦冬多糖的抗病毒活性,sOPS中剂量抗病毒作用最强。
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