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研究背景急性淋巴细胞白血病(ALL)是儿童中发病率最高的恶性肿瘤性疾病,现代主要通过联合化疗使儿童ALL的存活率大为改观,10年无事存活率(EFS)达78%,但仍有部分患儿因耐药而复发,国内外的临床研究报道均显示糖皮质激素(GC)耐药与ALL治疗效果和预后密切相关,现时已公认对GC治疗是否敏感是判定小儿ALL预后的一项强烈的、具有独立意义的指标。因此,了解GC耐药的机理、寻找能够逆转或能与GC协同作用而克服ALL细胞对GC耐药的方法 ,是进一步提高儿童ALL治愈率的重要途径,具有重要的临床意义。ALL GC耐药的分子调控机制至今仍不完全清楚,近来,越来越多研究致力于通过miRNA调控糖皮质激素受体(GR/NR3C1)对儿童ALL糖皮质激素耐药的探索。研究方法收集共40份儿童ALL骨髓样本,其中31例ALLGC敏感患儿骨髓样本和9例ALL GC不敏感患儿骨髓样本。通过生物信息学方法预测可能与NR3C1存在靶对关系的miRNA、双荧光报告基因测试、MTT、流式检测凋亡等细胞实验方法验证miR-124与NR3C1的靶对关系,并采qRT-PCR、Western blot等方法进一步在ALL患儿骨髓样本中检测miR-124的表达及NR3C1蛋白的表达情况;分析GC耐药的分子机制。研究结果 (1)NR3C1蛋白在GC敏感细胞/GC敏感患者中呈高表达,而在GC耐药细胞/GC不敏感患者中呈低表达;NR3C1mRNA在GC敏感细胞/GC敏感患者中呈高表达,而在GC耐药细胞/GC不敏感患者中呈相对低表达;(2)证实miR-124与NR3C1存在靶对关系,通过转录后抑制作用,抑制NR3C1蛋白的合成,促进细胞对GC耐药。研究结论 (1)发现NR3C1在GC敏感细胞/GC敏感患者中高表达,相反,在GC耐药细胞/GC不敏感患者中低表达;结果表明ALL GC耐药与否与NR3C1的表达密切相关。(2)经过预测与NR3C1相关的miRNA、双荧光报告基因测试和Western blot等实验证实miR-124与NR3C1之间的靶对关系,在ALL GC敏感与不敏感患者的临床样本中,NR3C1蛋白的表达与miR-124的表达呈负相关关系。(3)证实miR-124在儿童ALL中促进GC耐药的发生,可能成为今后临床诊断ALL GC耐药与否和治疗的新靶标。