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目的:进行PAC蛋白的表达和纯化,获得高纯度的抗原用于进行抗体检测。
方法:将转化了克隆有PAC蛋白基因的PET载体(PET-PAC)的大肠杆菌进行诱导表达,表达产物经Ni离子金属螫合层析纯化,并进行SDS—PAGE和Western hlot分析。
结果:含PET-PAC的大肠杆菌经诱导后,以可溶形式表达相对分子量约为95kD的目的蛋白,表达量约占总菌体蛋白的28%,SDS-PAGE证实纯度达94.8%。Western blot证实该蛋白具有良好的反应原性。
结论:成功表达和纯化了变形链球菌表面蛋白抗原,为龋齿DNA疫苗效力试验打下了基础。