【摘 要】
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采用PCR技术扩增得到Klebsiella pneumoniae XJPD-Li的甘油脱水酶dhaBCE连接到表达载体PET-28a(+)上,获得重组质粒PET-28a(+)-dhaBCE,并将其转化到大肠杆菌BL21(DE3)中诱导
【机 构】
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石河子大学食品学院新疆兵团化工绿色过程重点实验室,新疆石河子832000
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采用PCR技术扩增得到Klebsiella pneumoniae XJPD-Li的甘油脱水酶dhaBCE连接到表达载体PET-28a(+)上,获得重组质粒PET-28a(+)-dhaBCE,并将其转化到大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达。序列分析结果表明:片段长度为2693bp,α亚基1668bp,β亚基585bp, γ亚基426bp,分别编码555, 194和141个氨基酸,计算分子量分别为60541Da, 21268Da和16068Da。测序片段与GenBank中报道的K.pneumoniae甘油脱水酶编码基因相似性为99.41%,氨基酸相似性为99.33%。氨基酸残基的存在可能与酶的高温和偏碱环境的耐受性有关。同时,探讨了氨基酸残基对于甘油脱水酶结构与功能的影响。
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