石见穿提取物熊果酸抗人免疫缺陷病毒1的体外实验研究

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目的:找出中药石见穿具有抗人免疫缺陷病毒1(HIV-1)活性的有效化合物。方法:选用CEMx174细胞感染BK132HIV-1病毒为体外实验模型,利用系统溶剂分离法,根据极性大小依次用石油醚、乙酸乙酯、氯仿和正丁醇从石见穿75%醇提物浸膏中萃取4个部位,通过体外药效学实验,筛选出具有抗HIV-1活性的有效部位,然后将石见穿有效部位粗提物通过硅胶柱色谱洗脱、薄层色谱分析、香草醛显色等方法和高效液相色谱仪制备、核磁共振鉴定结构等手段及体外药效学方法分离鉴定出有效化合物。体外药效实验以细胞病变效应(CPE)、细胞内HIVRNA表达水平和上清中病毒载量为评价指标。结果:显微镜下观察,仅石见穿氯仿部位组观察不到合胞体的形成,与阳性组基本一致。石见穿氯仿部位分离后各流分的RT-PCR结果显示,该部位所分离得到的22-23流份细胞内HIVRNA相对量和上清中病毒载量均明显低于病毒组(P<0.05),且与阳性对照组相比,两组均无明显差异(P>0.05),经鉴定,具有抗HIV-1活性的黄绿色粉末22-23流份,为有效化合物熊果酸。结论:中药石见穿氯仿部位对HIV-1的复制有明显抑制作用,该部位分离得到的22-23流份即熊果酸,是抑制HIV-1复制的有效化合物,抑制效果与阳性药物AZT无明显差异,具有一定的开发和研究前景。
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