Rack1影响乳腺癌耐药细胞侵袭、迁移和增殖能力的作用机制研究

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目的:探讨RACK1(Receptor of activated protein C kinase 1)在乳腺癌耐药细胞侵袭、迁移和增殖过程中所起的作用。方法:采用siR NA技术敲减乳腺癌耐药细胞MCF-7/adr和MDA-MB-468/epr细胞中RACK1的水平,利用Transwell小室实验检测细胞迁移和侵袭能力的改变;再利用划痕实验检测RACK1下调后耐药细胞迁移能力的改变;利用CCK8实验检测RACK1下调后耐药细胞增殖能力和耐药能力的改变;利用shR NA技术构建RACK1稳定下调的乳腺癌耐药细胞系,通过小鼠体内成瘤实验检测RACK1下调后乳腺癌耐药细胞的转移和增殖能力。同时构建RACK1的246位氨基酸的突变体拯救细胞后检测耐药细胞的耐药能力,以及侵袭、迁移和增殖能力的变化。采用Western blot实验检测细胞侵袭和迁移相关的信号通路上关键分子ERK1/2、JNK、AKT、p38和STAT3的磷酸化水平的变化。结果:敲低乳腺癌耐药细胞中RACK1的表达显著抑制了细胞的侵袭、迁移和增殖能力,同时伴随着细胞耐药能力的下降。另外,通过构建RACK1的突变体证明RACK1的246位氨基酸的改变会影响细胞的生物学行为变化。Western blot的结果表明RACK1影响耐药细胞生物学行为的改变可能是通过改变PI3K/AKT信号通路中AKT分子的磷酸化水平来导致。结论:研究结果发现在乳腺癌耐药细胞中RACK1的水平改变对耐药细胞的侵袭、迁移和增殖能力有着重要的影响,同时对耐药细胞的耐药能力有影响。而且RACK1对细胞生物学行为的影响是通过AKT的磷酸化水平变化来起作用。说明RACK1在乳腺癌耐药细胞中发挥着一定的作用。
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