【摘 要】
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bZIP家族是植物转录因子家族中较大的家族之一,参与多种生物与非生物胁迫过程.药用野生稻(Oryza officinalis,CC染色体组)蕴含多种抗性基因,可广泛应用于水稻遗传改良中,
【机 构】
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华南农业大学农学院,广州510642
【出 处】
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广东省遗传学会第九届代表大会暨学术研讨会
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bZIP家族是植物转录因子家族中较大的家族之一,参与多种生物与非生物胁迫过程.药用野生稻(Oryza officinalis,CC染色体组)蕴含多种抗性基因,可广泛应用于水稻遗传改良中,但因其与栽培稻(AA染色体组)存在严重的生殖障碍,不能高效地利用其有利性状(或基因).本研究利用高通量测序技术获得药用野生稻幼苗在20％PEG-6000模拟干旱条件下的基因表达谱情况,筛选出表达水平显著差异的bZIP家族基因OobZIP1和OobZIP2.根据转录谱测序结果序列设计引物,分别以处理后药用野生稻基因组DNA和cDNA为模板,扩增出目的基因基因组序列及其全长CDS,测序结果表明,Oob ZIP1编码区全长3410bp,包括9个内含子,10个外显子,外显子长度为1134bp；OobZIP2编码区全长3285bp,包括10个内含子,11个外显子,外显子长度为1113bp.利用PFAM质结构域预测,结果发现Oob ZIP1和OobZIP2均具有完整bZIP家族保守结构域.酵母单杂交试验结果表明Oob ZIP1和OobZIP2在β-半乳糖苷酶滤纸活性显色反应中均显示蓝色,具有转录活性；经B半乳糖苷酶活性测定试验,Oob ZIP1活性大小为6.56U,OobZIP2为21.82 U.利用WOLF PSORT (http：//wolfpsort.org/)软件进行亚细胞定位预测,Oob ZIP1和OobZIP2均定位于细胞核.已构建35S：：OobZIP1和35S：：OobZIP2表达载体,通过根癌农杆菌介导法将其导入水稻品种日本晴,并获得T0代转基因株系,鉴定转基因株系和野生型植株在胁迫条件下的表型差异,可进一步分析两个基因及其抗逆性生物学功能.通过转录谱测定结合基因工程技术能有利于从非AA组野生稻发掘有利基因资源.
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