【摘 要】
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目的：优化细菌内毒素刺激小鼠腹腔巨噬细胞产生一氧化氮(NO)实验模型的条件。方法：采用Hanks液灌洗小鼠腹腔,收集腹腔留居巨噬细胞,利用铜绿假单胞菌脂多糖(LPS)作为内毒素
【机 构】
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School of Pharmaceutical Sciences,Southern Medical University,Guangzhou 510515,China
【出 处】
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中国药理学会抗炎免疫药理专业委员会成立30周年纪念大会暨2012年学术年会
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目的：优化细菌内毒素刺激小鼠腹腔巨噬细胞产生一氧化氮(NO)实验模型的条件。方法：采用Hanks液灌洗小鼠腹腔,收集腹腔留居巨噬细胞,利用铜绿假单胞菌脂多糖(LPS)作为内毒素刺激巨噬细胞产生NO,以Griess法检测培养上清液中NO的浓度,考察细胞浓度、LPS浓度、LPS刺激时长、培养液体积等因素对巨噬细胞产生NO的影响,优化实验条件,并用已知药物验证模型的可靠性。结果及结论：巨噬细胞浓度、LPS浓度、LPS刺激时长是建立内毒素刺激小鼠腹腔巨噬细胞分泌一氧化氮实验模型的主要影响因素。推荐方案为巨噬细胞浓度5X10“个细胞/ml，每孔100μl；LPS浓度10μg/ml；LPS刺激时长24或48h；培养液体积100至200μl。
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