【摘 要】
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目的 本研究旨在探讨抑制自噬对CRM1 抑制剂抗套细胞淋巴瘤效应的影响。方法 首先探讨CRM1 抑制剂,KPT-185,对MCL 细胞自噬流的影响,采用的方法主要有:MDC 染色分析自噬体的形成;Western-blot 检测LC3B 的切割;自噬双标腺病毒(mRFP-GFP-LC3)转染MCL细胞,检测MCL 细胞内LC3 以及自噬溶酶体的变化;Western-blot 检测p62 在溶酶体内的
【机 构】
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厦门大学附属中山医院(原:厦门中山医院)
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目的 本研究旨在探讨抑制自噬对CRM1 抑制剂抗套细胞淋巴瘤效应的影响。方法 首先探讨CRM1 抑制剂,KPT-185,对MCL 细胞自噬流的影响,采用的方法主要有:MDC 染色分析自噬体的形成;Western-blot 检测LC3B 的切割;自噬双标腺病毒(mRFP-GFP-LC3)转染MCL细胞,检测MCL 细胞内LC3 以及自噬溶酶体的变化;Western-blot 检测p62 在溶酶体内的降解。另外应用实时定量PCR 法、Western Blot 法、荧光共聚焦显微镜法和免疫共沉淀法探讨KPT-185对MCL 细胞自噬相关蛋白BECN1 细胞内定位和表达的影响和机制。最后应用CCK8 法,通过CalcuSyn 联合用药软件分析,观察CQ 和KPT-185 抗MCL 的协同作用。
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