顶复门原虫入侵宿主细胞是由虫体自身的能动性与宿主细胞F-actin(F-肌动蛋白)聚集引起的细胞骨架重排二者共同作用实现的。本研究在已建立的细胞培养模型上对柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)在入侵HCT-8细胞过程中进行亚细胞定位,观察HCT-8细胞F-actin的聚集情况,初步明确鸡球虫入侵与宿主细胞F-actin聚集的关系。通过将新鲜的Eimeria tenella子孢子接入HCT-8细胞制备细胞爬片,于感染后3h取样进行Phalloidin(毒伞素)及DAPI染色,利用荧光正置显微镜观察宿主细胞F-actin的聚集情况；采用抑制试验进一步证实宿主细胞F-actin聚集对Eimeria tenella子孢子入侵的作用：将具有抑制F-actin聚集作用的细胞松弛素D(Cytochalasin D)孵育HCT-8细胞,终浓度分别为1 ugμg/mL、5ugμg/mL、10ugμg/mL、25ugμg/mL、50ugμg/mL,孵育1h弃去抑制剂并接入一定剂量的子孢子,于感染6h后取样提取总RNA,利用Real-time PCR方法检测抑制剂作用前后子孢子的入侵率；同时对抑制剂作用前后的HCT-8细胞感染子孢子进行亚细胞定位,观察抑制前后HCT-8细胞中F-actin聚集的变化情况。结果亚细胞定位显示在子孢子接入HCT-8细胞3h后,可观察到在细胞与子孢子接触的粘附部位有F-actin大量聚集,呈非常明显的绿色亮带,而正常HCT-8细胞F-actin分布均匀未发生聚集；抑制试验显示,随Cytochalasin D浓度的升高,子孢子入侵率下降10％-90％。亚细胞定位显示Cytochalasin D作用HCT-8细胞后,F-actin聚集明显减少,绿色亮带较弱。本研究成功对Eimeria tenella子孢子入侵过程中HCT-8细胞F-actin聚集进行亚细胞定位,利用抑制试验建立了检测子孢子入侵率的方法,初步明确鸡球虫入侵与宿主细胞F-actin聚集密切相关,为进一步解析或阐明鸡球虫的入侵机制提供理论基础。