【摘 要】
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目前世界上解决由病毒感染造成马铃薯退化减产的主要对策是利用脱毒马铃薯做种薯，但是在我国使用脱毒种薯的种植面积不及总种植面积的四分之一，所以马铃薯种薯病毒病的检测就成
【机 构】
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青岛农业大学,山东青岛 266109
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目前世界上解决由病毒感染造成马铃薯退化减产的主要对策是利用脱毒马铃薯做种薯，但是在我国使用脱毒种薯的种植面积不及总种植面积的四分之一，所以马铃薯种薯病毒病的检测就成为马铃薯生产和种植中迫切需要解决的问题，常规的病毒检测方法如酶联免疫、分子杂交等主要是针对单一的病毒。近年来，PCR相关技术在植物病毒检测上的报道越来越多，本研究正是基于RT-PCR技术建立起来的三重RT-PCR分子检测方法，能够一步诊断生产中单独或复合感染PVY,PVS和PLRV的马铃薯材料。根据PVY、PVS和PLRV外壳蛋白基因(CP)序列的保守区域分别设计引物,利用三重RT-PCR技术实现了在同一反应体系条件中同时扩增出3种病毒产物.PVY、PVS和PLRV扩增产物的测序结果与设计的目的片段相符,长度分别为781、181和364 bp.对提取到的PVY、PVS和PLRV的RNA样品进行稀释后进行RT-PCR,检测到3种病毒的最低含量分别为4.5 pg到4.5 fg之间、3.7fg和4.6fg.三重RT-PCR为生产中检测单独或复合感染PVY、PVS和PLRV的马铃薯材料,提供了一种方便、高效的分子诊断方法.
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