【摘 要】
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目的:研究缺氧培养的大鼠外周血单核细胞(PBMCs)Raf-1、核转录因子κB(NF-κB)活性及肿瘤坏死因子α(TNF-α)表达的变化规律,探讨缺氧与全身炎症反应综合征(SIRS)的关系,为进
【机 构】
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第三军医大学新桥医院全军呼吸内科研究所,重庆,400037
【出 处】
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亚太呼吸病学会慢性阻塞性肺疾病研讨会暨中国西部呼吸与危重医学学术会议
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目的:研究缺氧培养的大鼠外周血单核细胞(PBMCs)Raf-1、核转录因子κB(NF-κB)活性及肿瘤坏死因子α(TNF-α)表达的变化规律,探讨缺氧与全身炎症反应综合征(SIRS)的关系,为进一步研究多器官功能障碍综合征(MODS)的肺启动机制奠定基础.
方法:采用明胶法分离大鼠外周血单核细胞,分为Forskolin+缺氧组和单纯缺氧组.Forskolin+缺氧组细胞在缺氧前予50μMForskolin预处理.两实验组均于低氧条件下(3％O2,5％CO2,92％N2)培养0、1、3、6、9、12、24h后,收集细胞及培养液上清,分别采用Raf活性检测试剂盒、电泳迁移分析法(EMSA)、逆转录PCR(RT-PCR)和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测Raf-1、NF-κB活性及TNF-α表达量.
结果:缺氧1～9h,Raf-1活性、NF-κB结合活性及TNF-α表达量显著高于正常对照组.缺氧后1～24h,Raf-1活性、NF-κB结合活性与TNF-αmRNA和蛋白表达水平间呈显著正相关.经10μmForskolin预处理后,缺氧1～9h,Raf-1活性、NF-κB结合活性及TNF-α表达量与正常对照组无显著差异.
结论:缺氧可显著增强大鼠外周血单核细胞的Raf-1活性及NF-κB结合活性,并可诱导其产生大量的促炎症因子TNF-α,这些变化可能与急性呼吸窘迫综合征(ARDS)时血浆中大量促炎症因子持续存在密切相关.
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