目的：完全意义上的组织工程皮肤应当包括表皮和真皮的完整结构，构成真皮结构的成纤维细胞和形成表皮结构的表皮细胞在在组织工程皮肤支架中具有不同的分布和生长状态。本研究拟构建胶原-壳聚糖/纤维蛋白胶不对称支架，使其既适合表皮细胞的生长以形成表皮层结构，又适合成纤维细胞的生长以形成真皮层结构。 方法：采用冻干法制备胶原-壳聚糖多孔支架，将纤维蛋白胶复合到其表面制备出不对称支架，然后在此不对称支架的小孔径面种植表皮细胞、大孔径面种植成纤维细胞构建出组织工程皮肤。 结果：组织学和扫描电镜证实构建的胶原-壳聚糖/纤维蛋白胶不对称支架具有双层结构，小孔径层孔径5~20um，大孔径层孔径80-150um；小孔径层种植表皮细胞，1 周便可见表皮层分化明显，3周时更加明显，组织形态与正常皮肤类似，大孔径层种植成纤维细胞，培养1 周后FDA-PI 染色显示细胞生长状态良好，2 周后的SEM 可见细胞以典型的形态附着在材料纤维上，周围有大量细胞外基质分泌。 结论：将胶原-壳聚糖多孔支架和纤维蛋白胶相结合成功地制备出一种不对称支架，此种不对称支架具有的微观结构适合种子细胞的有序分布和生长，且生物相容性好，适应了组织工程皮肤构建的需要，有潜在的应用前景。