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目的:非酒精性脂肪肝炎(NASH)发病率逐年上升,严重威胁人类健康,巨噬细胞在其中发挥重要作用。已有研究证实,抑制性免疫检查点分子Tim-3调控巨噬细胞功能,参与慢乙肝免疫耐受及肝细胞肝癌发生发展,但Tim-3是否调控巨噬细胞参与非酒精脂肪肝炎尚不明确。方法:体内实验给予C57BL/6野生鼠MCD、HFD饮食,建立非酒精脂肪肝炎模型,建模后免疫组化染色、RT-PCR、western blot检测肝组织Tim-3表达;流式检测不同肝巨噬细胞亚群Tim-3表达。Tim-3 KO鼠同样建模,化学法比较野生鼠及Tim-3 KO鼠建模后血清ALT及肝胆固醇、甘油三酯水平,酶学法比较二者肝及巨噬细胞IL-1β、IL-18、TNFα,western blot比较二者肝NLRP3、caspase-1、NOX2、NOX4表达。体外实验利用中和抗体anti-Tim-3及shRNA体外干预巨噬细胞Tim-3,利用DCFH-DA探针结合流式分析肝单个核细胞及巨噬细胞ROS水平,观察Tim-3在非酒精性脂肪肝炎模型中对巨噬细胞氧化应激的调控作用。结果:MCD及高脂饮食小鼠肝组织Tim-3显著高于正常饮食组小鼠,非酒精性脂肪肝炎鼠肝内F4/80~+CD11b~+、F4/80~+CD68~+、F4/80~+CD169~+巨噬细胞增多,且上述巨噬细胞亚群Tim-3表达显著上调。与WT小鼠相比,Tim-3KO鼠MCD饮食后肝组织炎性浸润增多,肝细胞空泡化及肝脂质沉积加重,血清ALT及肝内总胆固醇及甘油三酯明显增加,提示Tim-3发挥减轻NASH肝损伤作用。同时,Tim-3 KO鼠不同来源巨噬细胞(腹腔巨噬细胞、肝巨噬细胞、骨髓来源巨噬细胞)ROS均显著高于野生型鼠,且Tim-3KO小鼠肝组织NLRP3、caspase-1、IL-1β、IL-1 8及NOX2表达明显升高,提示Tim-3调控巨噬细胞氧化应激反应及炎性小体介导的炎症反应。anti-Tim-3中和抗体阻断实验及shRNA干预实验进一步证明Tim-3抑制巨噬细胞氧化应激及其介导的炎性反应。结论:免疫检查点关键分子Tim-3抑制巨噬细胞ROS产生及下游炎性因子释放,减轻NASH肝损伤。