程序降温过程中含水生菜种子(Lactucasativa)RNA降解和泛素化介导的蛋白降解的调控机制研究

来源 :上海市制冷学会第九届会员代表大会暨2015年学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yuanzhiwu1
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  含水生菜种子是种子低温保存的模式生物。本研究利用程序降温仪(Kryo series III)对含水(含水量50%)生菜(Lactuca sativa)种子进行快速和慢速降温处理,至-20℃做全转录组测序分析比较,发现RNA 降解通路和介导蛋白降解的泛素化连接酶的功能得到了富集,暗示了快速和慢速降温过程中RNA 和蛋白降解的调控发生了变化。检测了快速和慢速降温至冰冻温度(分别降温至-5℃,-10℃,-15℃,-20℃)过程中RNA 降解通路和蛋白泛素化连接酶E3—SCF 复合体因子的的mRNA 水平变化,以便为研究程序降温过程中的RNA和蛋白降解调控机制提供初步的研究基础。结果表明5′脱帽因子EDC4、3′脱腺苷酸尾巴因子CNOT1 以及5′→3′外切核酸酶因子XRN2 在慢速降温过程受到诱导,直到后期自身也被降解。程序降温对3′→ 5′核酸外切酶Rrp44 的诱导不明显。快速降温造成5′脱帽因子EDC4 和3′脱腺苷酸尾巴因子CNOT1 短时的抑制,可能是种子胚的应激反应,以暂时降低低温造成的RNA 降解,保护种子胚活力。介导蛋白降解的泛素化连接酶E3—SCF 复合体因子在快速降温早期(-10℃)和慢速降温的后期(-20℃)受到诱导,其在慢速降温后期、RNA降解功能增强条件下的mRNA 水平提高证明泛素化蛋白降解在慢速降温后期功能增强。总之,以上结果暗示快速降温早期RNA 降解因子的短时抑制是一种应激保护,而慢速降温中RNA 降解因子的诱导是种子细胞受伤害的反应,同时泛素化介导的蛋白降解可能是一种防御调控机制。
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