目的神经干细胞(neural stem cell)是一类具备自我更新能力、多向分化潜能和修复损伤神经组织的前体细胞,它能最终分化产生神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞。细胞信号调节激酶(ERK1/2)在有丝分裂原激活蛋白酶(MAPKs)家族中发挥调节细胞增殖和分化的重要作用。本研究探讨了ERK1/2在cNSC增殖、分化中的磷酸化表达情况,对明确cNSC增殖和分化的调控机制具有重要意义。方法分离培养E14.5小鼠皮层神经干细胞(cNSC),脱臼处死,75%酒精消毒后取胚胎置于预冷解剖液中,解剖镜下剥离脑膜和血管,胰酶消化后,加入无血清DMEM/F12(含1%N2和B27,20 ng/mLEGF和bFGF)轻轻吹打成单细胞悬液。培养的细胞经纯化后进行nestin免疫荧光染色和分组实验。分别收集1 d、3 d、5 d和7 d增殖和诱导分化过程中的cNSC,提取总蛋白进行蛋白电泳和western blot。结果 1)在cNSC增殖过程中,ERK1/2的磷酸化逐渐增加,5 d时达到最高,7 d时显著降低,而ERK1/2的表达没有明显变化;2)在cNSC诱导分化过程中,ERK1/2的磷酸化在3 d时显著降低,5 d后的表达逐渐增加,而ERK1/2的表达在1 d、3 d、5 d时无明显变化,7 d时显著降低。ERK1/2及其活性形式的表达变化趋势与cNSC增殖、分化的某些特性存在一致性,提示ERK12参与了对cNSC增殖分化的调控。