目的本研究以体外共培养的原代SD大鼠支持-生精细胞为模型,探究未被阐明的p53依赖途径和线粒体在MC-LR诱导的生殖细胞凋亡过程中的作用及机制。方法从未成年雄性SD大鼠睾丸中分离纯化支持-生精共培养细胞,建立原代培养细胞模型,确定MC-LR对睾丸支持-生精共培养细胞的半数抑制浓度(IC50),然后设置为不同浓度(0、9、18、36μg/mL)MC-LR以及36μg/ml MC-LR+PFTα(15μM)、36μg/ml MC-LR+CsA(10μM)、单独PFTα(15μM)和单独CsA(10μM)8个组,染毒24h后,检测各个组细胞凋亡率、线粒体膜电位以及Real time PCR,western blotting检测p53依赖途径凋亡相关蛋白(p53、PUMA、p21、Bax、clevead PARP和clevead caspase-3)表达情况。结果研究发现,微囊藻毒素-LR作用于共培养的睾丸支持-生精细胞后,可以激活p53依赖通路蛋白表达,并引起线粒体膜电位降低,细胞质中Cyt-c从线粒体向细胞质移动,诱导细胞发生凋亡。而P53抑制剂PFT-α在有效抑制p53蛋白表达的同时,可以改善睾丸支持-生精共培养细胞线粒体膜电位水平,阻止Cyt-c从线粒体向细胞质移动,减少凋亡发生。当加入线粒体损伤抑制剂CsA后,线粒体损伤程度降低,细胞质中Cyt-c表达水平降低,细胞凋亡水平降低。结论p53依赖途径介导了MC-LR诱导的大鼠睾丸支持-生精共培养细胞凋亡过程,并且mPTP开放在MC-LR致大鼠睾丸支持-生精共培养细胞凋亡发挥重要作用。