【摘 要】
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产黄青霉是工业上用于发酵生产青霉素的重要真菌。作为丝状真菌,它一般通过菌丝延伸和分支进行生长,但具体的调控机制尚未完全了解。已有研究表明青霉素的分泌与菌丝延伸
【机 构】
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中科院技术生物与农业工程研究所 安徽 合肥 230031
【出 处】
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第七届中国工业生物技术发展高峰论坛
论文部分内容阅读
产黄青霉是工业上用于发酵生产青霉素的重要真菌。作为丝状真菌,它一般通过菌丝延伸和分支进行生长,但具体的调控机制尚未完全了解。已有研究表明青霉素的分泌与菌丝延伸速率及顶端生长有关,因此对产黄青霉进行形态学描述具有重要意义。几丁质作为真菌细胞壁的主要成分,在决定真菌形态变化相关过程如顶端生长、分支以及细胞壁分化中起重要作用。作为几丁质合成过程中最关键的酶,几丁质合成酶已成为丝状真菌形态发生研究的前沿方向。在不同的真菌中存在着一种至多种的几丁质合成酶同功酶。这些同功酶在维持细胞壁完整性,菌丝正常生长和无性孢子产生等方面起重要作用,然而产黄青霉中还未见相关的研究报道。本文通过将产黄青霉全基因组与构巢曲霉中几丁质合成酶基因进行比对,发现该菌存在三种同源基因:chs4、Pc13g06340及Pc12g11730,分别编码III类几丁质合成酶CHS4和两个假定蛋白。我们选择一致性最高的chs4基因作为研究对象。设计引物以基因组为模板扩增chs4片段,与干扰载体pJL43-RNAi连接后进行转化。利用RT-PCR和qRT-PCR检测转化株中chs4的表达水平,发现各个菌的chs4基因表达均有不同程度地下降。所有转化株的生长速度和孢子产生率相对于原始菌都有明显下降,暗示chs4在菌丝发育和孢子形成中有重要作用。
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