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目的：糖尿病肾病是常见的糖尿病慢性微血管并发症之一,活性氧(ROS)和单核趋化蛋白-1(MCP-1)参与了糖尿病肾小球硬化的发生和发展,且两者之间密切相关。盐酸吡格列酮属于噻唑烷二酮类药物,除具降糖作用外,还具有抗氧化应激,抗炎症反应和降低尿蛋白等多方面的作用,对糖尿病肾脏病变有明显的防治作用。本课题观察盐酸吡格列酮对高糖培养的肾小球系膜细胞(MCs)氧化应激和MCP-1表达的影响,探讨其肾脏保护机制。
方法：体外培养MCs,随机分组为(1)正常对照糖(DMEM培养液糖浓度5.6mmol/L)；(2)高糖(DMEM培养液糖浓度25mmol/L)；(3)吡格列酮1组(高糖DMEM液+吡格列酮1×10-5 mmol/L干预)；(4)吡格列酮2组(高糖DMEM液+吡格列酮1×10-6 mmol/L干预)；(5)吡格列酮3组(高糖DMEM液+吡格列酮1×10-7mmol/L干预).培养48小时后收集各组细胞及上清液,以2,7-二氯双氢荧光素二乙酸酯(I)CFH-DA)为荧光探针,采用流式细胞仪法检测MCs内活性氧(ROS)水平。采用比色法检测MCs上清液中的丙二醛(MDA冶量和超氧化物歧化酶(SOI))活性。应用RT-PCR方法检测细胞MCP-lmRNA含量,采用ELLSA法检测细胞上清液中MCP-1蛋白浓度。
结果：与NG组比较,高糖刺激后MCs内ROS水平明显增加,上清液中MDA含量显著增高、SOD活性下降,且细胞MCP-1mRNA表达以及细胞上清液中MCP-1蛋白含量显著增高(P<0.05).盐酸吡格列酮干预后可明显抑制高糖刺激下的：MCs上述变化,且呈剂量依赖性。相关分析显示MCs内MCP-1mRNA表达与ROS水平呈显著正相关。
结论：盐酸吡格列酮可抑制高糖诱导的大鼠MCs氧化应激和MCP-l的过度表达,且呈现剂量依赖性,该作用可能与其肾脏保护部分有关。
方法：体外培养MCs,随机分组为(1)正常对照糖(DMEM培养液糖浓度5.6mmol/L)；(2)高糖(DMEM培养液糖浓度25mmol/L)；(3)吡格列酮1组(高糖DMEM液+吡格列酮1×10-5 mmol/L干预)；(4)吡格列酮2组(高糖DMEM液+吡格列酮1×10-6 mmol/L干预)；(5)吡格列酮3组(高糖DMEM液+吡格列酮1×10-7mmol/L干预).培养48小时后收集各组细胞及上清液,以2,7-二氯双氢荧光素二乙酸酯(I)CFH-DA)为荧光探针,采用流式细胞仪法检测MCs内活性氧(ROS)水平。采用比色法检测MCs上清液中的丙二醛(MDA冶量和超氧化物歧化酶(SOI))活性。应用RT-PCR方法检测细胞MCP-lmRNA含量,采用ELLSA法检测细胞上清液中MCP-1蛋白浓度。
结果：与NG组比较,高糖刺激后MCs内ROS水平明显增加,上清液中MDA含量显著增高、SOD活性下降,且细胞MCP-1mRNA表达以及细胞上清液中MCP-1蛋白含量显著增高(P<0.05).盐酸吡格列酮干预后可明显抑制高糖刺激下的：MCs上述变化,且呈剂量依赖性。相关分析显示MCs内MCP-1mRNA表达与ROS水平呈显著正相关。
结论：盐酸吡格列酮可抑制高糖诱导的大鼠MCs氧化应激和MCP-l的过度表达,且呈现剂量依赖性,该作用可能与其肾脏保护部分有关。