【摘 要】
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[目的]沃尼妙林是新一代截短侧耳素类动物专用抗生素,是用于防治畜禽呼吸道疾病及肺脏支原体和猪繁殖与呼吸疾病综合症等病毒性疾病的特效药物.目前,检测沃尼妙林的方法
【机 构】
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中国农业大学动物医学院,北京100193
【出 处】
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2013年中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十二次学术讨论会
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[目的]沃尼妙林是新一代截短侧耳素类动物专用抗生素,是用于防治畜禽呼吸道疾病及肺脏支原体和猪繁殖与呼吸疾病综合症等病毒性疾病的特效药物.目前,检测沃尼妙林的方法主要有高效液相色谱和酶联免疫吸附法,这些方法设备要求高,操作复杂,耗费时间长,相比之下荧光偏振免疫分析技术(FPIA)快速、高效更适用于小分子检测.本研究旨在利用卵黄抗体(IgY)代替传统的IgG分子,建立一个高效、快速的检测猪肉中沃尼妙林残留量的FPIA方法.[方法]利用沃尼妙林侧链氨基与不同荧光素上的活性氨基之间的反应,制备VAL-DTAF、VAL-FITC、VAL-FC三种荧光标记物,薄层色谱纯化分离,选取最佳荧光标记物.对空白猪肉用酸化乙腈提取,正己烷除脂,过膜,氮吹,复溶,建立标准曲线.在50、100、200μg/Kg三个浓度添加,测定回收率.[结果]三种tracer中VAL-DTAF与最佳IgY有高结合,利用该tracer建立标准曲线,沃尼妙林的最低检测限为4.05 μg/Kg,在10.6-115.42 μg/Kg范围内线性关系良好,相关系数r大于0.99,灵敏度IC50为34.98 μg/Kg,对猪肉在50、100、200μg/Kg添加,回收率为77.6％-89.58％,日内相对标准偏差为2.4-10.0％,日间相对标准偏差为3.5-13.3％.[结论]本研究成功合成的tracer-DTAF-VAL与卵黄抗体建立的FPIA方法满足猪肉中沃尼妙林残留量的检测.
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