鸡血藤抗肿瘤有效部位诱导A549肺癌细胞非凋亡性程序化细胞死亡研究

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目的探讨鸡血藤抗肿瘤有效部位 SSCE 对人非小细胞肺癌 A549细胞的杀伤特点和作用机制。方法采用四氮唑溴盐(MTT)法、绘制生长曲线观察药物对 A549细胞增殖的影响。采用流式细胞术分析药物对肿瘤细胞周期的影响。通过苏木精-伊红(HE)染色和激光共聚焦扫描荧光显微镜技术、 AnnexinV-PI 双标法,Caspase-3活性检测以及 DNA ladder 琼脂糖凝胶电泳,观察药物对细胞凋亡的诱导作用。结果鸡血藤抗肿瘤有效部位 SSCE 对 A549细胞有明显杀伤作用,24 h 药效最强,IC50值为25.54 μg·mL-1。细胞周期分析显示,药物作用12 h,S 期细胞增多,G0/G1和 G2/M 期细胞减少,细胞周期变化在24 h 后明显减弱,48 h 恢复正常。形态学观察可见,药物作用短时间内(8~12 h),细胞核发生皱缩扭曲,胞浆内出现较多空泡及颗粒状物,胞膜完整;随后细胞核固缩,可见少量凋亡小体。细胞膜磷脂酰丝氨酸(PS)外翻在用药后12 h 最显著。具有时间-剂量依赖关系。Caspase-3活性无明显升高,且与剂量成反比。DNA 琼脂糖凝胶电泳未见片断化梯形条带。结论鸡血藤抗肿瘤有效部位 SSCE 对 A549细胞具有直接杀伤作用,药效迅速,细胞周期受到干扰(S delay),主要表现为非凋亡性程序化细胞死亡。
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