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【目的】聚腺苷二磷酸核糖水解酶(PARG)基因沉默所致细胞聚-腺苷二磷酸(ADP)核糖基化水平上调可抑制苯并芘(BaP)诱导的16HBE细胞恶性转化,但其具体机制仍不清晰。文献报道聚-ADP核糖基化调控的组蛋白修饰在肿瘤发生发展中发挥重要作用,本研究拟通过分析PARG基因沉默对组蛋白修饰的影响探讨聚-ADP核糖基化在BaP致癌过程中的作用机理。【材料与方法】分别选用课题组前期构建的BaP诱导的人支气管上皮细胞恶性转化模型(BTC-16HBE)和同样处理但未恶性转化的PARG基因沉默人支气管上皮细胞(BTC-shPARG)作为研究对象,同时设立未处理对照(C-16HBE、CshPARG)。酸法提取各组细胞(C-16HBE、BTC-16HBE、C-shPARG和BTC-shPARG)组蛋白,蛋白定量后,使用精氨酸酶37℃酶切18 h,脱盐预分离处理,然后进行质谱检测,对组蛋白及其翻译后修饰做定性定量分析;进一步利用western blot对相关的修饰位点进行验证。【结果】质谱检测结果发现PARG基因沉默调控BaP诱导的恶性转化的相关组蛋白修饰位点有:H2AK5Ac、 H2AK9Ac、 H2AK13Ac、 H2A.ZK4K7K11Ac、 H2AK9Me、H2BK5ac、 H2BK5me、 H2BK11dime、 H2BK16dime、 H2BK20dime、 H2BK24me、H2BK28me;进一步利用western blot验证分析发现:H2AK9Me在BTC-16HBE组中的相对表达量明显上调,是C-16HBE组的1.4倍(p<0.05);而在BTC-shPARG组中H2AK9Me相对表达略微下调,是C-shPARG组的0.87倍(p<0.05);H2AK9Me在BTC-shPARG组中的相对表达是BTC-16HBE组的0.66倍,明显下调(p<0.05)。H2BK5ac在BTC-16HBE中的相对表达发生下调,是C-16HBE中的0.46倍(p=0.0026);而在BTC-shPARG中的相对表达发生上调,是C-shPARG中的2.57倍(p<0.0001)。H2BK5me在BTC-16HBE中的相对表达变化没有统计学意义,但是在BTC-shPARG中的相对表达发生上调,是C-shPARG中的3.99倍(p=0.0158)。【结论】PARG基因沉默可通过抑制H2AK9Me和上调H2BK5ac和H2BK5me的表达对抗BaP诱导的细胞恶性转化。