【摘 要】
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目的 验证人MicroRNA335(hsa-miR-335)与嗜酸细胞趋化因子1(CCL11)、嗜酸细胞趋化因子3(CCL26)、SOX4的靶向调控关系.方法 选择网络在线的生物信息学软件miRanda和TargetScan共同预测为hsa-miR-335靶基因的CCL11、CCL26、SOX4做为研究对象.构建CCL11、CCL26、SOX4基因3端非翻译区(3UTR)双荧光素酶报告基因载体pM
【机 构】
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广西壮族自治区人民医院 530021
【出 处】
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中华医学会2015年全国变态反应学术会议
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目的 验证人MicroRNA335(hsa-miR-335)与嗜酸细胞趋化因子1(CCL11)、嗜酸细胞趋化因子3(CCL26)、SOX4的靶向调控关系.方法 选择网络在线的生物信息学软件miRanda和TargetScan共同预测为hsa-miR-335靶基因的CCL11、CCL26、SOX4做为研究对象.构建CCL11、CCL26、SOX4基因3端非翻译区(3UTR)双荧光素酶报告基因载体pMIR-REPORT-CCL11 3UTR、pMIR-REPORT-CCL263UTR、pMIR-REPORT-SOX4 3UTR; 采用Lipofectamine 2000将真核表达质粒pMIR-REPORT-CCL11 3UTR、pMIR-REPORT-CCL26 3UTR、pMIR-REPORT-SOX4 3UTR、阳性对照质粒分别与Pre-miR?miRNA335 Precursor或阴性对照质粒共转染到293 T7/17细胞;双荧光素酶报告基因检测系统检测CCL11、CCL26、SOX4基因3UTR与Hsa-mir-335共转染荧火虫(Firefly)和海洋腔肠(Renilla)荧光素酶活性,并与阴性对照对比.
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