【摘 要】
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全细胞催化剂具有较高的酶活,无需繁琐的酶提纯过程等优点.我们运用微生物表面展示技术成功将有机磷水解酶(OPH)突变体展示在大肠杆菌表面,该表面展示菌株的全细胞OPH酶
【机 构】
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中国科学院青岛生物能源与过程研究所生物传感技术团队,青岛市崂山区松岭路189号,266101
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全细胞催化剂具有较高的酶活,无需繁琐的酶提纯过程等优点.我们运用微生物表面展示技术成功将有机磷水解酶(OPH)突变体展示在大肠杆菌表面,该表面展示菌株的全细胞OPH酶活达到了2.16 U/OD600cells,为目前已报道的所有OPH表面展示菌株中最高.并且该OPH表面展示菌株有很好的热稳定性和底物特异性.非硅基类的有序介孔碳(OMCs)材料是一种介稳态的碳晶体,具有非常大的比表面积、巨大的孔容量及有序排列的孔结构,已广泛应用于吸附、催化、电容器的电极材料和分离提纯等领域.依次将OMCs、大肠杆菌表面展示有机磷水解酶全细胞(OPH-bacteria)固定在电极上构建了OPH-bacteria/OMCs/GCE电化学微生物传感器.通过检测OPH-becteria催化水解对硝基苯基有机磷的产物p-NP的氧化电流间接实现有机磷的检测.在最佳实验条件下,对氧磷、对硫磷、甲基对硫磷在OPH-bacteria/OMCs/GCE上的检测范围分别为0.05-25μM、0.05-25μM及0.08-30μM,检出限分别为9.0 nM、10 nM、15 nM(S/N=3).该微生物传感器稳定性好,且适用于海水、污水等实际样品中有机磷的检测.
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