【摘 要】
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目的：通过观察柔红霉素(DNR)作用后急性早幼粒细胞白血病(APL)细胞株HL-60敏感细胞中microRNA-21、microRNA-181d、microRNA-125b、let-7f和microRNA-27a等5种microRNAs(miRNA
【机 构】
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广西医科大学第一附属医院儿科 530021
【出 处】
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中华医学会第十八次全国儿科学术会议
论文部分内容阅读
目的：通过观察柔红霉素(DNR)作用后急性早幼粒细胞白血病(APL)细胞株HL-60敏感细胞中microRNA-21、microRNA-181d、microRNA-125b、let-7f和microRNA-27a等5种microRNAs(miRNAs)的表达变化,探讨这些miRNAs表达与HL-60细胞耐药性形成的相关性及其潜在的临床意义.方法：常规培养HL-60敏感细胞和HL-60/A耐药细胞.设置实验组、对照组1和对照组2.实验组是使用小剂量DNR持续作用于HL-60敏感细胞,以观察DNR对HL-60敏感细胞的增殖和miRNAs表达的影响.对照组1和2分别是HL-60/A DNR耐药细胞和不接受DNR持续作用的HL-60敏感细胞.用MTT法检测柔红霉素对HL-60细胞增值的影响.用实时荧光定量RT-PCR的方法检测miRNA-21等五种miRNAs的表达量,并用克隆测序方法分析上述5种miRNAs PCR产物的碱基序列.结果：1.MTT试验结果 随着小剂量DNR持续作用时间的延长,DNR对HL-60敏感细胞的抑制作用减弱,并于加药后的第10天左右,抑制率逐渐进入平台期;2.RT-PCR的检测结果 与对照组2相比,对照组1耐药细胞中的miRNA-181d、miRNA-27a和let-7f的表达下调(P＜0.05),而实验组敏感细胞中这些miRNAs的表达于加药后的第7天开始下调(P＜0.05).相反,对照组1中的miRNA-21和miRNA-125b表达上调(P＜0.05),而实验组敏感细胞中这2种miRNAs的表达则于加药后的第7天开始上调(P＜0.05);3.miRNA PCR产物的克隆测序结果5种受检miRNAsPCR产物的碱基序列与预期的miRNAs的碱基序列一致,表明本研究所用的实时荧光定量RT-PCR引物可以特异性地扩增HL-60细胞中的靶miRNAs.结论：miRNA-21、miRNA-125b、miRNA-181d、miRNA-27a和let-7f等5种miRNAs的表达改变可能与HL-60细胞耐药性的产生有关.
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