【摘 要】
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中国大鲵虹彩病毒(CGSIV)是从患病的中国大鲵体内分离得到的一株病毒.它是驯养大鲵死亡的致病感染原之一.研究CGSW病毒的基因结构、表达形式和功能对病毒的感染机制和分子生物学机理有着重要的意义.本论文主要对CGSIV的丝氨酸苏氨酸磷酸激酶基因(STPK)进行研究,以探讨该基因的生物学信息和表达方式,在病毒粒子和病毒周期中存在的情况,为该基因的功能研究提供基本材料.本文利用PCR从CGSN病毒基因
【机 构】
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暨南大学生命科学技术学院,广州510632 中山大学生命科学学院,广州510275
【出 处】
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中国遗传学会第九次全国会员代表大会暨学术研讨会
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中国大鲵虹彩病毒(CGSIV)是从患病的中国大鲵体内分离得到的一株病毒.它是驯养大鲵死亡的致病感染原之一.研究CGSW病毒的基因结构、表达形式和功能对病毒的感染机制和分子生物学机理有着重要的意义.本论文主要对CGSIV的丝氨酸苏氨酸磷酸激酶基因(STPK)进行研究,以探讨该基因的生物学信息和表达方式,在病毒粒子和病毒周期中存在的情况,为该基因的功能研究提供基本材料.本文利用PCR从CGSN病毒基因组上扩增出基因编码序列,并将此克隆至PET-22b(+)原核表达载体上,大肠杆菌表达纯化蛋白.再将纯化的蛋白注射小鼠,制备了针对该蛋白的特异性抗体.然后CGSIV病毒感染细胞,CHX和AraC抑制实验条件下,利用RT-PCR和Western blot技术检测STPK的表达时序,表明CGSIV的STPK基因属于早期表达基因.将CGSIV病毒感染细胞,检测了STPK蛋白在宿主细胞内的定位情况.结果表明STPK蛋白存在于细胞质中.对CGSIV病毒粒子进行了分离纯化,并且检测表明STPK蛋白存在于成熟的病毒粒子上.同时研究利用反义吗啉环寡核苷酸KD技术下调CGSIV ORF65的表达，检测STPK蛋白在病毒复制中的作用。
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