【摘 要】
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目的:本研究旨在通过体外及体内研究,来探讨NELL-1蛋白对牙髓细胞神经向分化的作用。方法:对Wistar大鼠牙髓组织切片进行免疫荧光双染,观察NELL-1与牙髓神经标记物的关系。建
【机 构】
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山东省口腔组织再生重点实验室山东大学口腔医学院; 济南市口腔医院;
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目的:本研究旨在通过体外及体内研究,来探讨NELL-1蛋白对牙髓细胞神经向分化的作用。方法:对Wistar大鼠牙髓组织切片进行免疫荧光双染,观察NELL-1与牙髓神经标记物的关系。建立大鼠牙髓炎模型,加入含NELL-1蛋白的胶原海绵,利用免疫组织化学染色检测牙髓组织切片中牙髓神经标记物的表达。体外培养人牙髓细胞,鉴定牙髓细胞表面干细胞标志物以及检测牙髓细胞多向分化潜能。将不同浓度的NELL-1蛋白(0ng/ml,50ng/ml,75ng/ml,100ng/ml,and125ng/ml)与人牙髓细胞共培养12h,24h,3d,通过实时定量聚合酶链反应技术检测神经相关基因在mRNA水平上的表达,Western blot技术检测神经相关基因在蛋白水平上的表达。结果:NELL-1与P物质(Substance P,SP)、巢蛋白(Nestin)在大鼠牙髓组织中共表达,加入NELL-1蛋白的大鼠牙髓细胞神经相关基因SP、Nestin、神经元特异性烯醇化酶(neuron-specific enolase,NSE)表达量增高,NELL-1蛋白与人牙髓细胞共培养后神经相关基因Nestin、β-Ⅲ微管蛋白(β-Ⅲtubulin)、胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)表达量增高,并且NELL-1蛋白在100ng/ml时作用最佳。结论:NELL-1蛋白对牙髓细胞神经向分化起到正向调控诱导作用。
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