背景:NMAAP1(novel macrophage activate associated protein 1)是本室通过蛋白质组学的方法在BCG活化的小鼠腹腔巨噬细胞上发现的特异性表达的蛋白之一,已证实该蛋白可调节巨噬细胞向M1型极化,增强其抗肿瘤作用。但BCG是否可以直接促进巨噬细胞中NMAAP1的表达还不清楚,是否通过NF-κB信号转导通路也是本研究要解决的问题。目的 :阐明BCG能否体外直接活化巨噬细胞使其高表达NMAAP1及其分子机制。方法 :利用RAW264.7巨噬细胞系,采用0.05、0.1、0.2mg/ml的BCG刺激,分别于6h、12h、24h收取细胞,提取m RNA。1、RT-PCR检测BCG体外直接刺激RAW264.7细胞系NMAAP1的表达是否升高。2、加入1m M、2m M、4m M的NF-κB抑制剂sulfasalazine作用15min、30min、1h后,0.1mg/ml的BCG刺激12h,采用同样的方法检测NMAAP1的表达情况。3、加入25μM、50μM、100μM的NF-κB抑制剂JSH-23作用15min、30min、1h后,0.1mg/ml的BCG刺激12h,仍采用同样的方法检测NMAAP1的表达情况。结果 :0.1mg/ml的BCG体外直接刺激RAW264.7细胞系12h,NMAAP1的表达较空白对照组明显升高。NF-κB抑制剂sulfasalazine作用后,BCG体外直接刺激的RAW264.7细胞系NMAAP1的表达较空白对照组显著下降;抑制剂JSH-23作用后,出现同样结果。结论 :BCG可直接刺激巨噬细胞高表达NMAAP1,而这种作用是通过NF-κB信号转导通路实现的。本研究有助于阐明膀胱癌卡介苗灌注疗法的相关机制并推动新型抗肿瘤药物的研究和开发。