基于CRISPRCas9的雄激素受体基因敲除研究

来源 :中国生物工程学会第十届学术年会暨2016年全国生物技术大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户：ksxy008

【摘要】

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目的：研究探索在细胞水平实验雄激素受体基因敲除的实现方法,为前列腺疾病雄激素受体通路的功能研究提供细胞株材料.方法：通过在线软件设计针对雄激素受体(AR)的sgRNA靶向序列,

【作者】

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江福能陈冠星梁应科江敏耀叶剑恒刘文华吴永定何慧婵

【机构】

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广州医科大学附属广州市第一人民医院,泌尿外科和广东省临床分子医学及分子诊断重点实验室,广东广州510180广东省农业科学院,农业生物基因研究中心,广东广州510640广州医科大学附属广州市第一人民医院

【出处】

：

中国生物工程学会第十届学术年会暨2016年全国生物技术大会

【发表日期】

：

2016年8期

【关键词】

：

前列腺疾病病理机制雄激素受体基因敲除

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目的：研究探索在细胞水平实验雄激素受体基因敲除的实现方法,为前列腺疾病雄激素受体通路的功能研究提供细胞株材料.方法：通过在线软件设计针对雄激素受体(AR)的sgRNA靶向序列,将这一靶序列克隆到PX330载体中并测序验证.将克隆好的CRISPR-AR载体转染T293细胞,提取DNA,PCR和测序鉴定基因敲除效率.结果：CRISPR-AR载体测序证明质粒载体构建成功;T293细胞转染实验证明CRISPR-AR载体具有80％以上的敲除效率.结论：基于CRISP/Cas9技术的构建的CRISPR-AR载体可用于细胞的AR敲除,可进一步用于AR基因敲除细胞株构建.

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