【摘 要】
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目的分离纯化脓肿分枝杆菌RNA聚合酶,观察其在体外的转录功能以及对利福平的敏感性。方法对脓肿分枝杆菌的破菌上清液用聚乙烯亚胺(PEI)进行沉淀,用不同浓度NaCl进行洗涤和重
【机 构】
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同济大学附属上海市肺科医院; Department of Tuberculosis,Pneumology Hospital;
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目的分离纯化脓肿分枝杆菌RNA聚合酶,观察其在体外的转录功能以及对利福平的敏感性。方法对脓肿分枝杆菌的破菌上清液用聚乙烯亚胺(PEI)进行沉淀,用不同浓度NaCl进行洗涤和重提,然后通过DNA-纤维素柱进行层析进一步提纯。通过3H-ATP的掺入,对纯化的RNA聚合酶体外转录功能进行测定;并在体外转录体系中加入不同浓度的利福平,观察对脓肿分枝杆菌的RNA聚合酶功能的抑制作用。结果通过此纯化方法得到的RNA聚合酶,在体外能以小牛胸腺DNA作为模板进行RNA的合成。对于高耐药的脓肿分枝杆菌标准株,0.25ug/ml的利福平就能够抑制RNA聚合酶的功能;对于分枝杆菌临床敏感株,这一浓度为0.25-0.5ug/ml。结论脓肿分枝杆菌对利福平的耐药并不是由于RNA聚合酶的变异所致。
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