抗β-淀粉样蛋白(Aβ1-42)单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立及初步鉴定

来源 :第九次全国生物制品学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yuriany
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目的:建立抗β样淀粉蛋白(Aβ)单克隆抗体杂交瘤细胞系,制备Aβ单克隆抗体,鉴定其免疫学特性,为阿尔茨海默症的防治机理研究提供原材料。 方法:用戊二醛法将半抗原邶Aβ1-42偶联于载体蛋白BAA,形成结合抗原BAA-Aβ;以此结合抗原BSA-Aβ分别用常规小鼠腹腔免疫注射法和微量小鼠足垫免疫注射法免疫BALB/C小鼠,采用杂交瘤技术建立分泌Aβ单克隆抗体细胞株;用体内诱生腹水法生产Aβ单抗,并用三步硫酸铵盐析法提纯。用间接ELISA法测定Aβ单抗的反应特异性及用常规免疫学检测法鉴定Aβ免疫学特性。 结果: 筛选出A-B7,A-D11,A-E9三株高敏感和高特异性杂交瘤细胞株,并生产腹水单抗,其单抗的间接ELISA效价分别为2×10-5,2×10-5,1×10-5。细胞染色体数目在70~90之间。 结论: 用单克隆抗体杂交瘤技术成功建立了抗Aβ单克隆抗体杂交瘤细胞系,制备了半抗原Aβ的单克降抗体。
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