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目的:探索新生隐球菌侵袭血脑屏障通过小鼠脑微血管内皮细胞b.End3 S100A10影响基质金属蛋白酶9(MMP9),从而影响新生隐球菌侵袭血脑屏障的能力;同时验证金属蛋白酶抑制剂GM6001对新生隐球菌穿过血脑屏障有一定的保护作用,为进一步研究临床用药提供体外实验基础。方法:将慢病毒转染小鼠脑微血管内皮细胞(b.End3)细胞,分别筛选稳定下调S100A10、MMP9的细胞系,用荧光显微镜和qPCR定性和定量验证其下调程度。将LVshRNAS100A10 bEnd.3和空载NC分别与新生隐球菌B3501构建简易体外血脑屏障感染模型,在mRNA水平和蛋白水平检测基质金属蛋白酶9(MMP9)表达量的差异。将LV-shRNAMMP9-bEnd.3和空载NC分别构建transwell体外血脑屏障感染模型,证明新生隐球菌在不同血脑屏障模型的侵袭能力。小鼠脑微血管内皮细胞(b.End3)细胞构建体外血脑屏障模型,按梯度加入GM6001,检测不同浓度的GM6001作用下,隐球菌穿过血脑屏障的活菌数。结果:成功构建NC细胞系,LV-shRNA S100A10 bEnd.3细胞系和LV-shRNA MMP9-bEnd.3细胞系,并能稳定下调对应目的基因。LV-shRNA S100A10 bEnd.3细胞系在感染新生隐球菌后,其MMP9的表达在mRNA水平和细胞内外蛋白水平均比对照组有明显下调,且差异有统计学意义。新生隐球菌穿透由LV-shRNA MMP9-bEnd.3构建的transwell体外血脑屏障模型的活菌数较对照组少且差异有统计学意义。在bEnd.3构建血脑屏障模型时,加GM6001组transwell下室的活菌数更少,10μM时下室涂板所得活菌数最少,且差异有统计学意义。结论:新生隐球菌能通过脑微血管内皮细胞bEnd.3表达的S100A10而影响基质金属蛋白酶9(MMP9)的表达,从而对其穿过血脑屏障起到一定作用。隐球菌嗜中枢感染时,金属蛋白酶抑制剂可作为一种血脑屏障保护剂,缓解并减少感染的扩散,为临床辅助治疗隐球菌性脑炎/脑膜炎提供一种新的治疗手段。