草鱼谷氨酰胺转运载体ASCT2基因的克隆与表达特征

来源 :第十届世界华人鱼虾营养学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:LanceXulei
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  ASCT2是一种定位于小肠上皮刷毛缘膜上的谷氨酰胺转运载体,在吸收中性氨基酸方面发挥着重要的作用.本研究旨在探讨不同蛋白源,蛋白水平以及谷氨酰胺和谷氨酰胺二肽对草鱼肠道ASCT2基因表达量的影响.本实验利用同源克隆和RT-PCR技术获得了草鱼ASCT2(SLC1A5)基因cDNA,并就不同蛋白源和蛋白水平以及外源性谷氨酰胺和谷氨酰胺二肽对该基因在草鱼肠道ASCT2表达的影响进行了分析.实验结果表明该cDNA开放阅读框为1626bp,编码540个氨基酸.系统进化表明,ASCT2与斑马鱼的亲缘性最近,此外,利用Real-time检测了该基因的时空表达,结果显示该基因在鳃和肝及中肠中表达量较高.在不同蛋白水平饲养后,草鱼肠道ASCT2的表达在低水平(22%)日粮蛋白饲料添加后表达量显著增高.此外,豆粕作为蛋白添加剂比鱼粉更能促进ASCT2的表达.通过喂养谷氨酰胺和谷氨酰胺二肽,草鱼肠道ASCT2分别在7.5 g/kg及2.5 g/kg时表达量最高.ASCT2转录因子AP1则分别在2.5g/kg及5 g/kg时表达量达到最高.本研究为提供草鱼高效健康的养殖配方具有一定的参考价值.
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