【摘 要】
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为准确、快速鉴定中药材北豆根及其混伪品,保证临床用药安全,考察ITS2序列对北豆根及其混伪品鉴定能力,本研究采用试剂盒法提取药材的基因组DNA,PCR扩增其核糖体DNA的内转录
【机 构】
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中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所
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为准确、快速鉴定中药材北豆根及其混伪品,保证临床用药安全,考察ITS2序列对北豆根及其混伪品鉴定能力,本研究采用试剂盒法提取药材的基因组DNA,PCR扩增其核糖体DNA的内转录间隔区(internal transcribed spacer 2,ITS2)并进行双向测序,应用CodonCode Aligner V3.7.1进行序列校对拼接,采用MEGA5.0计算ITS2序列的GC含量,种内、种间Kimura 2-parameter(K2P) 遗传距离,并构建NJ系统聚类树来进行鉴定分析.结果表明,北豆根药材的ITS2序列全长为203bp,种内变异极小,平均K2P遗传距离为0,远小于北豆根药材及其混伪品的种间平均K2P遗传距离(0.586),NJ树鉴定结果表明基于ITS2序列的DNA条形码手段对北豆根及其混伪品的鉴定是高效的.因此,ITS2条形码可有效鉴定中药材北豆根及其混伪品,且具有较高的稳定性和准确性,为中药材鉴定提供了新的技术手段.
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