【摘 要】
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厚壳贻贝(Mytilus coruscus)黏附蛋白分子mcofp-3 (M.coruscus foot protein-3)主要分布于贻贝足丝盘,在贻贝水下黏附过程中起到关键作用,但其含量极低且水溶性差,妨碍了
【机 构】
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浙江海洋学院 海洋生物资源及分子工程实验室,浙江舟山,316004
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厚壳贻贝(Mytilus coruscus)黏附蛋白分子mcofp-3 (M.coruscus foot protein-3)主要分布于贻贝足丝盘,在贻贝水下黏附过程中起到关键作用,但其含量极低且水溶性差,妨碍了对其进行深入研究.为大量获得厚壳贻贝黏附蛋白分子mcofp-3分子进行后续研究,利用真核表达体系对厚壳贻贝足丝蛋白mcofp-3进行了重组表达研究.首先构建了厚壳贻贝的mcofp-3基因真核表达载体pVT 102U/α/meofp-3,经鉴定后将序列正确的真核表达载体采用LiAC转化法将重组表达质粒转化到S78酿酒酵母中,对重组酵母进行RT-PCR分析以及1.0％的琼脂糖凝胶电泳检测.结果表明重组的mcofp-3得到了成功的转录；重组酵母进行常规发酵,发酵菌液经阳离子交换柱及反相高效液相色谱分离以及Tris-Tricine-SD S-PAGE检测,发现重组的mcofp-3得到了成功表达,表达产物分子量为6KD左右,与预期结果一致.
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