【摘 要】
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背景确定LH-C的抗病毒活性及其对病毒感染的免疫调节作用。方法采用MTT法和空斑减少法测定LH-C的体外细胞毒性和抗病毒活性。用单周期病毒生长条件下的时程研究来确定病毒复制被阻断的阶段。用间接免疫荧光法检测LH-C对病毒核蛋白核输出的影响。用Western blotting和Real-time RT-PCR检测LH-C对不同信号转导事件和细胞因子/趋化因子表达的调节。病毒接种后,给BALB/c小鼠
【机 构】
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广州呼吸病研究所,国家呼吸病重点实验室,国家临床研究中心,广州医科大学第一附属医院
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背景确定LH-C的抗病毒活性及其对病毒感染的免疫调节作用。方法采用MTT法和空斑减少法测定LH-C的体外细胞毒性和抗病毒活性。用单周期病毒生长条件下的时程研究来确定病毒复制被阻断的阶段。用间接免疫荧光法检测LH-C对病毒核蛋白核输出的影响。用Western blotting和Real-time RT-PCR检测LH-C对不同信号转导事件和细胞因子/趋化因子表达的调节。病毒接种后,给BALB/c小鼠注射不同浓度的LH-C,连续5d。检测小鼠体重、病毒滴度和肺组织病理改变,并用实时荧光定量RT-PCR检测炎症细胞因子水平。结果 LHC在体外对不同毒株的流感病毒增殖均有抑制作用,半数抑制浓度(IC50)为0.35~2 mg/ml。LH-C抑制病毒感染早期(0~2h),抑制病毒诱导的NF-kB活化,减轻病毒诱导的IL-6、IL-8、TNF-α、IP-10和MCP-1的基因表达,呈剂量依赖性。LH-C处理有效地削弱了病毒RNP的核输出。LH-C组小鼠肺内病毒滴度下降。感染早期炎性细胞因子水平也降低。结论 LH-C作为一种中药方剂,对包括新出现的H7N9在内的一系列流感病毒具有广谱作用,特别是对病毒感染的免疫应答有调节作用。因此,LH-C可能是治疗流感病毒感染的一种有前途的选择。
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