第一部分钙离子调控下NDGA与牙本质胶原纤维交联机制研究针对已经成熟的牙釉质粘接而言,牙本质粘接仍然存在着很多问题。在粘接过程中,混合层中裸露的胶原纤维易被激活状态的MMPs和组织蛋白酶降解。因此,国内外学者尝试通过MMPs抑制剂和蛋白交联剂提高牙本质粘接的耐久性。本论文通过钙离子预处理NDGA后交联脱矿牙本质胶原以验证其机制及对粘接性能影响。首先利用氯化钙预处理NDGA配置成一定质量分数的溶液,通过紫外-可见分光技术直接观察溶液的吸收峰强度及其变化,再用交联剂处理经48h 10%H3PO4溶液完全脱矿的牙本质片,通过XPS观察钙离子调节下NDGA与Ⅰ型胶原反应机制。再利用外源性酶降解经交联剂处理的脱矿牙本质测定酶解前后质量损失、HYP含量释放、弹性模量,对此分析其力学性能及抗酶解性能,然后利用TEM观察交联后胶原形态变化。结果通过UV-VIS明确了NDGA可能在两个相邻的邻醌基团之间形成双醌键的假设,从而使得NDGA聚合物嵌入了牙本质胶原纤维,XPS验证了钙离子与NDGA的酚羟基形成了化学结合,证实了钙离子的引入较单纯应用交联剂能有效提高牙本质胶原的力学性能及抗酶解性能,揭示了钙离子存在下酶解胶原纤维结构排列更加整齐紧密。最终本实验从分子水平明确了钙离子调节下I型胶原分子与NDGA的结合及其交联反应机制,验证了其对牙本质胶原交联稳定作用。第二部分生物改良型酸蚀剂对牙本质粘接影响的研究蛋白酶抑制剂和胶原交联剂能够延长树脂牙本质粘接材料使用寿命,但单独应用交联剂无疑增加了临床操作步骤。之前已有课题组证实了将原花青素加入酸蚀剂能够显著提高其力学性能和抗酶解性能。因此,在本次研究中,我们尝试将生物交联剂NDGA加入酸蚀剂观察牙本质胶原内源性酶活性并验证其作用下的树脂牙本质粘接强度。实验试剂分四组:10%H3PO4、10%H3PO4+DMSO、10%H3PO4+0.5%NDGA、10%H3PO4+1%NDGA,用上述溶液作为酸蚀交联剂处理牙本质,然后进行树脂粘接,再垂直于粘接面进行切割,将其固定于载玻片,滴加明胶酶放置恒温箱中孵育后,利用激光共聚焦显微镜在激发波长488nm下观察生物改良型酸蚀剂处理树脂牙本质粘接后的内源性酶活性。类似地,将上述粘接好的树脂牙本质块部分用含0.1mg/ml胶原酶的人工唾液避光环境37°C浸泡一个月,每三天换液。另一部分切割成0.8mm*0.8mm的小柱形试件,用万能试验机测试其即时和长期微拉伸粘接强度以验证其力学性能。用SPSS16.0软件对牙本质粘接的微拉伸强度值做双因素方差分析。激光共聚焦显微镜结果观察,对照组观察到强烈的绿色荧光,表明这些部位荧光素结合的明胶酶被牙本质胶原纤维内源性酶强烈水解;10%H3PO4+1%NDGA改良酸蚀剂荧光强度最弱,表明其对应内源性酶活性最弱。微拉伸强度结果表明了10%H3PO4+1%NDGA改良酸蚀剂组对应树脂牙本质粘接强度最强,说明高浓度改良酸蚀剂能够有效降低原位酶活性并提高树脂牙本质粘接强度。