红脂大小蠹化学信息物质的研究

来源 :中国林业科学研究院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:pcfanzb
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红脂大小蠹(Red Turpentine Beetle, RTB, Dendroctonus valens LeConte)属鞘翅目(Coleoptera),小蠹科(Scolytidae),大小蠹属(Dendroctonus),是一种蛀干、蛀根的毁灭性林业害虫。该虫是北美地区的次期害虫,1998年在我国山西省发现后,现已经在我国四‘省(山西、陕西、河南和河北)均有分布。其主要寄主油松广泛分布在我国大部分地区,因此该外来入侵小蠹虫将会给我国林业造成具大的损失。本研究重心在于探索红脂大小蠹触角是否具有感受信息素的感受器;新羽化的雌虫注射保幼激素Ⅲ后,能否释放信息素引诱其它成虫;利用Y型嗅觉仪测试红脂大小蠹对寄主韧皮与交配前后成虫的趋向行为;红脂大小蠹危害油松后,诱导油松树干挥发性单萜类物质相对含量的变化规律;分析不同接虫处理的伐桩挥发性成分,并进行野外引诱试验;定量分析不同阶段危害不同寄主的红脂大小蠹成虫后肠信息素物质。利用扫描电子显镜微镜(SEM)与透射电子显微镜(TEM),发现红脂大小蠹触角感受器共4种类型,其中毛形感受器具有3种亚型,锥形感受器具有2种亚型,还有刺形感受器与栓锥形感受器。通过TEM切片分析发现,毛形感受器Ⅰ与Ⅲ具有微孔,感器腔内含有大量神经树突,是一类感受信息素的感受器;毛形感受器Ⅱ腔内无神经树突;两种锥形感受器与一种栓锥形感受器表皮具有密集微孔,该类感器结构与红脂大小蠹感受寄主气味有关。另外,观察红脂大小蠹腹部发现,雌虫末节背板与雄虫相比短小,且被盖于次节背板下。雄虫6节膜质背板层次明显,末节背板从次节中嵌出。此法区分红脂大小蠹成虫对于野外信息素引诱试验,统计雌雄数量等科研工作提供很大帮助。对新羽化的红脂大小蠹雌虫2-3腹板间注射保幼激素Ⅲ(Juvenile HormoneⅢ, JHⅢ) (2μL,10μg/μL)溶液,发现JHⅢ溶液能够促使红脂大小蠹成虫对处理后的雌虫产生聚集行为反应。并且处理间差异达到极显著水平。可以判定红脂大小蠹雌虫释放信息素。Y型嗅觉仪实验表明,红脂大小蠹通过油松韧皮部挥发性成分实现寄主选择行为;交配后的红脂大小蠹成虫引诱能力大大提升,且在喂食寄主韧皮后对其它成虫的引诱能力与对照相比差异达到极显著水平。采用动态顶空法收集Y管实验中各处理挥发性物质,再通过GC-FID分析发现,喂食韧皮后的雌虫释放单萜氧化类物质,如反式马鞭草烯醇。但对红脂大小蠹成虫未发现明显引诱效果。喂食寄主韧皮,并且交配后的红脂大小蠹释放氧化类物质如L(-)-马鞭草烯酮和(-)-桃金娘烯醇等。这些物质与寄主韧皮挥发性气味结合,对红脂大小蠹成虫具有更强的引诱能力。采用动态顶空的吸附方法,抽取连续11个不同阶段的对照、损伤与虫害油松树干的挥发物成分。运用标准样品和GC-MS对挥发物成分定性后,对各单萜图谱峰面积利用百分比法进行定量分析。与对照和损伤油松相比,虫害油松含有高比率的(+)-α-蒎烯(超过90%)和月桂烯,但(+)-3-蒈烯,(-)-β-蒎烯,莰烯和柠檬烯含量较低。对照和损伤油松中(+)-3-蒈烯含量高于虫害油松中(+)-3-蒈烯含量(低于4%)。在损伤油松中,(+)-3-蒈烯含量从损伤4天后的最低水平逐渐恢复到对照油松中(+)-3-蒈烯含量水平。虫害处理诱导油松树释放的(+)-3-蒈烯明显降低。(-)-β-蒎烯和柠檬烯在不同处理的油松中含量相近,但在接入雌雄虫后3个处理间差异存在显著性。油松伐桩对红脂大小蠹的引诱效果最好,其中接入雌雄成虫的能够增强这种效果。油松树干的引诱效果次于伐桩但优于油松木段。GC-MS分析表明,伐桩挥发性成分种类上多于树干与木段,且单萜氧化类物质与倍半萜含量较高。氧化类物质中,(-)-顺式马鞭草烯醇在伐桩中释放量最大,其中接入雌雄虫处理的伐桩释放量达0.278μg/cm2。伐桩释放的挥发物的种类远多于树干与木段;油松树干释放的挥发性物质主要以单萜为主;木段处理的挥发性物质,无论种类上还是在数量上均少于其它两处理。适宜的寄主能够增强红脂大小蠹释放(-)-顺式马鞭草烯醇、反顺马鞭草烯醇、(-)-桃金娘烯醛,这一特点在伐桩处理中表现最为明显。野外生测试验表明,与对照比较马鞭草烯酮是一种明显驱避剂,其它成分均增加对照诱捕量。野外收集不同寄主不同危害阶段的红脂大小蠹成虫,放入液氮后带回实验室。提取成虫后肠后,利用GC-FID、GC-MS定性其中的信息素成分,根据各物质的GC图谱峰面积利用GC-FID外标法进行定量分析。结果表明,主要有5种信息素成分,分别是桃金娘烯醇、反式马鞭草烯醇、马鞭草烯酮、顺式马鞭草烯醇和桃金娘烯醛。各阶段中桃金娘烯醇的释放量最高,结合红脂大小蠹危害特点分析,该物质可能是红脂大小蠹一种聚集信息素成分。反式马鞭草烯醇的释放量仅次于桃金娘烯醇,该物质可能是红脂大小蠹调控种内聚集危害寄主的一种关键信息素成分。而雌虫释放的马鞭草烯酮与顺式马鞭草烯醇可能是调控种内竞争的多功能信息素物质。
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