在兽医临床上,猪、羊、牛、马、犬等动物的消化系统疾病约占临床总发病量的30%,而食欲不振、消化不良、便秘腹胀、瘤胃积食、胃肠弛缓等症候,几乎在动物的大部分疾病中伴发或继发。对于该类症候的处理,常选用氨甲酰胆碱、新斯的明等拟胆碱类西药,但其毒性大、作用强烈。传统的中兽医对胃肠功能障碍的治疗有着丰富的经验,且中兽药药源丰富、副作用小,运用中兽药治疗胃肠功能障碍性疾病已愈来愈受到重视。我国近几年大力提倡与推动中药现代化,其中一项重要内容就是“中药制剂工艺研究,在传统的汤、散、丸等剂型基础上按西药制剂原理增加新的剂型”。为此,我们从《中国兽药典》(2005年版二部)中初选8种常用的健胃类中兽药散剂,将其制备成相应的颗粒剂,采用家兔离体肠管试验,从8种颗粒剂中筛选出药效作用相对于散剂最好的一种,将筛选出的颗粒剂作进一步的工艺、药效、毒性等研究。本文分为五部分：第一部分,健胃类中兽药处方筛选。本研究从《中国兽药典》(2005年版二部)中初选8种常用的健胃类中兽药散剂,分别制备成颗粒剂,以家兔离体肠管为药效筛选模型,筛选出药效优于散剂的颗粒剂。结果显示,以龙胆草、苍术、柴胡、干姜和碳酸氢钠组成的猪健散所制备成的颗粒(暂命名为猪健颗粒,以下同),能显著增加肠管收缩张力,其药效明显优于猪健散。为此,本文选取猪健颗粒作进一步的工艺、药效、毒性和质量标准等研究。第二部分,猪健颗粒单味药提取工艺优化及颗粒剂制备。(1)龙胆草有效成分的提取,以乙醇浓度、提取温度、溶媒用量和提取次数为考察因素,以龙胆苦苷的收率为指标,结果最佳提取条件为：乙醇浓度为70%,提取温度为80℃,溶媒用量为10倍,提取次数为3次；(2)苍术有效组分的提取,以浸泡时间(h)、加水量(倍)和提取时间(h)为考察因素,以苍术挥发油的收集量为指标,结果苍术挥发油的最佳提取条件为：浸泡时间12h,加水量10倍,提取时间为8h；(3)柴胡有效组分的提取,以浸泡时间(h)、加水量(倍)和提取时间(h)为考察因素,以柴胡挥发油的收集量为指标,结果柴胡挥发油的最佳提取条件为：浸泡时间12h,加水量10倍,提取时间为5h。猪健颗粒的制备：取干姜10g、碳酸氢钠20g和提取后的龙胆草、苍术和柴胡药渣,依次加入8倍量、6倍量、4倍量的水煎煮2h,过滤,收集滤液,合并三滤液,滤液与上述苍术、柴胡蒸馏后的水溶液合并,滤过。滤液加热浓缩至约500ml,自然冷却至室温,分别加入滤液体积的40%、60%、80%乙醇,搅匀,静置沉淀24h,滤过,收集滤液,将猪健散处方药制成相对密度为1.62的流浸膏。按流浸膏：淀粉：蔗糖(粉)=1：2：0.5的比例,混匀,制软材；过50目筛(3号筛)制成湿颗粒；湿颗粒于55℃烘干18h,得干颗粒(水分含量控制在2.0%以内)；整粒分别过筛2次：第一次过14目筛,第二次过50目筛；苍术和柴胡的挥发油用乙醇溶解后(挥发油：乙醇=1：3),均匀喷洒在整粒后的颗粒表面,适度混匀,阴干即得。工艺优化前后猪健颗粒的药效验证：通过家兔离体肠管试验,将工艺优化前后的猪健颗粒进行药效验证,发现在相同浓度下,工艺优化的比未优化的猪健颗粒药效要好,如在0.1g／mL浓度下,工艺优化后的颗粒对肠平均张力增率为0.765%,工艺优化前的颗粒对肠平均张力增率为0.547%；在0.3g／mL浓度下,工艺优化后的颗粒对肠平均张力增率为1.052%,工艺优化前的颗粒对肠平均张力增率为0.826%；第三部分,猪健颗粒部分药效试验。(1)小肠推进试验：散剂组按每只6.67g／kg、0.2mL／10g(体重)灌胃给药,颗粒剂组按每只6.37g/kg、0.2mL/10g(体重)灌胃给药,连续5日,禁食不禁水12h,于第6日给药1h后,每只小鼠灌服炭末混悬液0.2mL,20min后处死,取出整个胃肠道,测量幽门至回盲部全长及幽门至炭末前沿的距离,计算炭末推进百分率。结果显示,猪健颗粒促进小鼠胃肠蠕动作用优于猪健散。(2)胃排空试验：散剂组按每只6.67g／kg、0.2mL/10g(体重)灌胃给药,颗粒剂组按每只6.37g/kg、0.2mL/10g(体重)灌胃给药,连续5日。禁食不禁水12h。于第6日给药1h后,每只小鼠灌胃0.1%甲基橙溶液0.2mL。20min后处死,取胃内容物用10mL蒸馏水稀释后,用5%NaHCO3调pH至6.0～6.5,以2000r／min离心10min,取上清液在波长420nm下测定甲基橙光密度。以0.1%甲基橙溶液0.2mL加入10mL蒸馏水混匀后测其光密度作为基数甲基橙光密度。计算甲基橙胃残留率。结果显示,猪健颗粒对小鼠的胃排空作用优于猪健散。第四部分,猪健颗粒部分安全性试验。(1)猪健颗粒急性毒性试验：通过预试验,一次给予小鼠灌胃猪健颗粒的最大浓度(7.06g／mL)和小鼠灌胃可承受的最大体积(0.4mL／10g),每天给药1次,连续灌胃14d,结果小鼠全部存活。因此,无法测出该颗粒的LD50,提示该颗粒是较安全的。进一步测定该颗粒对小鼠的最大耐受量：试验组按每只小鼠0.4mL／10g的剂量灌胃7.06／mL浓度的猪健颗粒,按此剂量间隔6h灌胃1次,共灌胃3次,停止给药,观察小鼠状态14d；对照组用蒸馏水代替药液,其灌胃体积、次数及间隔时间与试验组同。结果显示,在连续14d的观察中,试验组与对照组的小鼠均未出现抽搐、震颤等行为异常,呼吸、饮食正常、活动自如,给药后14d未见死亡。猪健颗粒的小鼠最大给药剂量为0.04mL／g×7.06g/mL×3×1000=847.2g/kg,相当于兽药典规定猪健散临床最大给药量6.67g／kg的127倍。(2)猪健颗粒长期毒性试验：试验组设高剂量组(266.80g／kg,临床推荐剂量的40倍)、中剂量组(133.40g／kg,临床推荐剂量的20倍)、低剂量组(66.70g／kg,临床推荐剂量的10倍),给药容积10.0mL/kg体重,每天给药1次,连续给药60d；对照组用等体积蒸馏水代替药液,其灌胃体积、次数与试验组同。结果显示,试验组大鼠的一般情况检查、血液学指标和脏器系数各组与对照组相比均无显著性差异(P＞0.05),表明猪健颗粒无长期毒性。第五部分,猪健颗粒质量标准初步研究。(1)一般检查：对猪健颗粒的外观、粒度、水分含量、溶化性进行考察,结果均符合要求。(2)含量测定：建立了HPLC检测猪健颗粒中龙胆苦苷、苍术内酯Ⅲ含量的方法,检测了5批猪健颗粒样品,结果显示,猪健颗粒中龙胆苦苷的含量为2.0%～3.0%、苍术内酯Ⅲ的含量为0.05%～1.0%；化学法测定5批样品中碳酸氢钠含量为11.0%～13.0%。(3)鉴别：利用薄层色谱法对猪健颗粒中柴胡、干姜进行了鉴别,结果均为正反应。