彩色马铃薯miR858对花青素生物合成调控关系研究及其MYB基因的克隆

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马铃薯(Solanum tuberosum)是世界上仅次于小麦、水稻、玉米之后的第四大作物,在我国农业中占有重要地位,彩色马铃薯因含有丰富的花青素、多酚类物质等,具有更高的营养保健价值,可作为特色食品开发。microRNA是植物体内普遍存在的非编码RNA,广泛参与植物生长发育、代谢调节及多种逆境胁迫响应。研究表明miR858可能是参与植物花青素合成调控的miRNA之一,但其在彩色马铃薯中调控花青素的研究尚未见有报道。本研究对彩色马铃薯不同部位中miR858的表达情况进行研究,同时对其花青素及其他农艺性状进行测定,以明确miR858与花青素合成间的调控关系;为了找到miR858的靶基因,利用生物信息分析手段对克隆出的StMYB48-like进行功能预测。这些研究为明确miR858在彩色马铃薯花青素合成调控作用奠定基础。主要研究结果如下:1)彩色马铃薯黑金刚和华颂66号均为中晚熟品种,红美为早熟品种。各品种块茎芽眼浅、薯形好、结薯集中整齐,单株产量和商品薯率分别在0.5kg左右和85%以上。各品种块茎的淀粉含量变幅为11.5~15.28,Vc含量在21.20~41.73之间。2)miR858在3个彩色马铃薯品种中不同组织中均有表达,但不同组织的花青素含量与miR858的表达存在品种差异性,其中紫色马铃薯品种黑金刚、华颂66号中miR858的表达情况和花青素的含量呈正相关,红色马铃薯品种红美miR858的表达情况和花青素的含量呈负相关,这可能是马铃薯的品种特异性决定了其花青素调控中基因表达的差异性。3)在室内、外栽培环境下,3个彩色马铃薯茎、叶的miR858表达情况和花青素含量变化趋势一致,且不同环境下miR858表达与花青素含量呈负相关。4)成功的在3个彩色马铃薯的叶中克隆出相同序列的StMYB48-like基因,结构域MYB-DNA-binding的位置在2-27,信号肽的位置在40-59;马铃薯StMYB48-like和StMYB48与拟南芥AtMYB48的相关性高,预测其是miR858的靶基因,参与调控植物的生长发育和免疫。
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